| 全血基因組提取試劑盒II 產(chǎn)品簡介： 本試劑盒通過裂解紅細胞、裂解白細胞及細胞核,、沉淀蛋白,、分離基因組等過程從全血中提取基因組。試劑盒特點：提取的基因組DNA長度大于20kb, 可用于PCR擴增,、內(nèi)切酶消化以及膜雜交等,；每100ul全血樣品預期提取量1-5ug；所提基因組DNA效果好,；提取過程不超過45分鐘,；可室溫保存1年。與全血基因組提取試劑盒（I）不同的是裂解紅細胞及有核白細胞同時進行,，省去了多個步驟,，復合裂解液中含有抑制DNA酶的成分，在加熱（65°C）狀態(tài)下,，可保證完整的基因組DNA的充分裂解釋放,，異丙醇沉淀時，罕見渾濁的蛋白質(zhì)雜質(zhì)共沉淀,。本試劑盒提供100次100ul全血樣本基因組提取的足量試劑,。 本試劑盒也可用于培養(yǎng)細胞，組織基因組以及培養(yǎng)細菌或真菌基因組DNA的提取,。 試劑盒組成 1,、細胞復合裂解液：35ml 2、蛋白沉淀液： 25ml×1瓶 3,、DNA溶解液： 5ml瓶 4,、說明書： 1份 自備試劑 本試劑盒沒有提供,，但*的試劑包括：異丙醇（國產(chǎn)分析醇）；70%乙醇,。 樣品 1,、 樣品要求：用于DNA提取的全血應為抗凝血（EDTA, 肝素或檸檬酸鈉抗凝），抗凝血在4°C存放5天以內(nèi)（存放時間長,，DNA產(chǎn)量低）,，-20°C存放一個月以內(nèi), -80°C至少可存放2年均能純化出高質(zhì)量的DNA（凍存血較新鮮血產(chǎn)量低）。 2,、 全血需求量：本試劑盒可一次提取少至20-300ul,多至10ml的全血DNA,標準提取量為100ul,。 注：血液及組織標本應視為傳染性材料處理。 操作程序（以100ul全血為例） 1,、 細胞復合裂解液置65°C水浴中使其中的結(jié)晶溶解,。 2、 吸取100ul混勻的全血至1.5ml離心管中,，加入結(jié)晶成分已溶解的細胞復合裂解液300ul,，混璇器震蕩混勻20秒，置65°C水浴中反應20分鐘,。 3,、 加入200ul蛋白沉淀液，上下顛倒5-6次使兩者混勻,。 4,、 13000-16000×g，離心3-5分鐘,。 5,、 將上清液（約500ul）轉(zhuǎn)移至新的離心管中，加入等體積異丙醇,，此時可見透明的絮狀物,，混勻后離心，同步驟4,，傾去上清,。 6、 加入200ul 70%的乙醇溶液（基因組DNA在70%乙醇中,，存于-80 C,，可長期保存），來回倒置,，清洗管壁,，離心，同步驟4,。 7,、 移去70%乙醇,，倒置離心管于干凈的濾紙上，自然干燥10-15分鐘,，加入33ul DNA溶解液,。快速漩渦震蕩1-2秒,，使DNA溶解液沖刷到所有沉淀的DNA,。 8、 65 C水浴1小時,，或4 C過夜使DNA充分溶解（要求不嚴格的PCR試驗可縮短時間或省去該步）,，輕輕彈動管壁有助于溶解。 各種容積全血基因組DNA提取所需的溶液組份量
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