酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀,,酶標(biāo)儀檢測(cè)技術(shù)是一種高通量微孔板檢測(cè)技術(shù),操作簡(jiǎn)便,,被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué),、生物制藥、體外診斷,、食品安全,、環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域。傳統(tǒng)酶標(biāo)儀是指具備吸收光檢測(cè)功能的酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀,,隨著科學(xué)技術(shù)發(fā)展和市場(chǎng)需求不斷豐富,,如今酶標(biāo)儀所具備的檢測(cè)功能日益豐富,在光吸收檢測(cè)(Abs)基礎(chǔ)上增加了熒光強(qiáng)度(FI),、發(fā)光檢測(cè)(Lum),、熒光偏振(FP)、時(shí)間分辨熒光(TRF),、勻相時(shí)間分辨熒光(HTRF)等多種檢測(cè)技術(shù),。然而每一種技術(shù)都具有的應(yīng)用價(jià)值和局限性,下面將對(duì)幾個(gè)主流技術(shù)進(jìn)行詳細(xì)介紹,。
工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同,,在特定波長(zhǎng)下檢測(cè)被測(cè)物的吸光值,稱為光吸收檢測(cè)(Absorbance,,Abs),。只做吸收光檢測(cè)的酶標(biāo)分析儀實(shí)際上就是一臺(tái)變相光電比色計(jì)或分光光度計(jì),其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同,。光源發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,,進(jìn)入塑料微孔板中的待測(cè)標(biāo)本,。
熒光(Fluorescence)是一些原子和分子吸收特定波長(zhǎng)的光(激發(fā):Ex),隨后短暫發(fā)射 (Em) 更長(zhǎng)波長(zhǎng)的光的特性,。激發(fā)峰和發(fā)射峰之間的距離稱為斯托克斯 (Stokes) 位移,,該位移取決于熒光基團(tuán)。熒光利用一個(gè)外部光源,,在特定波長(zhǎng)下激發(fā)樣品,,熒光基團(tuán)受到適當(dāng)波長(zhǎng)的激發(fā),分子從基態(tài)轉(zhuǎn)化成激發(fā)態(tài),。隨著分子回到基態(tài),,能量會(huì)以熱(損失能量)和能量更低、波長(zhǎng)更長(zhǎng)的光的形式釋放,。
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