當(dāng)前位置:上海添時(shí)科學(xué)儀器有限公司>>技術(shù)文章>>瘦肉精介紹及其檢測方法
瘦肉精介紹及其檢測方法
在我國,,通常所說的“瘦肉精”則是指克倫特羅,。它曾經(jīng)作為藥物用于治療支氣管哮喘,后由于其副作用太大而遭禁用,。
瘦肉精是一類動(dòng)物用藥,,有數(shù)種藥物被稱為瘦肉精,例如萊克多巴胺(Ractopamine)及克倫特羅(Clenbuterol)等,。將瘦肉精添加于飼料中,,可以增加動(dòng)物的瘦肉量、減少飼料使用,、使肉品提早上市,、降低成本。但因?yàn)榭紤]對人體會(huì)產(chǎn)生副作用,,各國開放使用的標(biāo)準(zhǔn)不一,。
其它這樣類似藥物還有沙丁胺醇(Salbutamol)和特布他林(Terbutaline)等,同樣能起到“瘦肉”作用,、卻對人體健康危害過大,,因而造成安全隱患。它們也因而在遭到禁用,。
英文名:
Clenbuterol; Spiropent; Planipart; NAB365,;4-Amino-3,5-dichloro-alpha-(((1,1-dimethylethyl)amino)methyl)benzenemethanol
CAS號:37148-27-9
鹽酸克倫特羅結(jié)構(gòu)簡式
分子式:C12-H18-Cl2-N2-O
理化特性
白色或類白色的結(jié)晶粉末,,無臭、味苦,,熔點(diǎn)161℃,,溶于水、乙醇,,微溶于丙酮,,不溶于已醚。
檢測方法
GB/T 5009.192-2003 動(dòng)物性食品中克倫特羅殘留量的測定
氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)
GC-MS法優(yōu)點(diǎn)是把色譜快速的分離效果和質(zhì)譜高靈敏度的定性分析有機(jī)合起來,,能在多種殘留物同時(shí)存在的情況下對某種特定的殘留物進(jìn)行定性,、定量分析,而且具更高的檢測極限,。Fente C. A等用GC-MS法檢測牛毛中CLB的殘留,,低檢測限為5ng/g[6];Pteer Batioens應(yīng)用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(GC-MS-MS)對牛,、羊,、豬組織中的CLB含量進(jìn)行檢測,低檢測限為2ng/g[7],;劉琪等用GC-MS法(EI離子源)檢測豬尿中的CLB,,檢測限為0.5ng/mL;VanRhijin等用*基硅基或2-二甲基硅基嗎啉衍生物檢測尿提取物中的CLB,,衍生物用電脈沖方式或化學(xué)離子化方式掃描,,會(huì)產(chǎn)生更高的靈敏度。另外,,GC-MS法與HPLC法相比,,檢測靈敏度更高,假陽性率更低,。因此,,我國將GC-MS法定為檢測CL B的確證性方法(NY/T468~2001)。
液相色譜法(HPLC)
HPLC適合測定熱不穩(wěn)定和強(qiáng)極性的β-激動(dòng)劑及其代謝產(chǎn)物,,而且,,HPLC可以與柱前提取、純化及柱后熒光衍生化反應(yīng)和質(zhì)譜(MS)等系統(tǒng)聯(lián)用,,容易實(shí)現(xiàn)分析過程的自動(dòng)化,。黃士新等(1995)應(yīng)用紫外檢測器,在λ=243nm,,色譜柱:shimpackCLC-ODS150×6.0mn,流速:1mL/min,,柱溫:室溫30℃的條件下檢測豬肝臟和豬肉中的CLB殘留,,低檢測限可達(dá)2ng/g[4],。國外有人應(yīng)用HPLC (二極管陣列檢測器)測定動(dòng)物性食品中CLB殘留,測得低檢測限為1.26ng/g,,回收率達(dá)98.9%[5],。目前,我國已將HPLC法作為檢測CLB殘留的半確證性方法,,低檢測限范圍為1~15ng/g,,其優(yōu)點(diǎn)是專屬性好、選擇性強(qiáng),、檢測度較高,,而且假陽性率低;缺點(diǎn)是樣品處理時(shí)間長,,檢測過程煩瑣,、難于操作,需貴重儀器,,在實(shí)際應(yīng)用中受到一定的限制,。
酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA )ThermoMK3 FC 酶標(biāo)儀
利用免疫學(xué)抗原抗體特異性結(jié)合和酶的催化作用,通過化學(xué)方法將植物辣根過氧化物酶(HRP)與克倫特羅(CL)結(jié)合,,形成酶偶聯(lián)克倫特羅,。將固相載體上已包被的抗體(羊抗兔IgG抗體)與特異性的抗克倫特羅抗體結(jié)合,然后加入待測克倫特羅和酶偶聯(lián)克倫特羅,,它們競爭性與克倫特羅抗體結(jié)合,,洗滌后加底物,根據(jù)有色物的變化計(jì)量待測克倫特羅量,。若待測克倫特羅多,,則被結(jié)合的酶偶聯(lián)克倫特羅少,有色物量就少,。用目測法或比色法測定樣品中的克倫特羅含量,,比色的佳波長為450 nm,參比波長應(yīng)大于600 nm,。
液相色譜—質(zhì)譜/質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)
參見SN/T 1924—2007 進(jìn)出口動(dòng)物源食品中克倫特羅,、萊克多巴胺、沙丁胺醇,、特布他林殘留量的檢測方法,。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于動(dòng)物源性食品肌肉和內(nèi)臟中克倫特羅、萊克多巴胺,、沙丁胺醇,、特布他林殘留量的檢測。
試樣中的藥物殘留采用pH5.2的乙酸銨緩沖液提取,,同時(shí)加入β-鹽酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酯酶進(jìn)行酶解后,,提取液經(jīng)C18和SCX雙SPE柱凈化,,液相色譜—質(zhì)譜進(jìn)行測定,內(nèi)標(biāo)法定量,。
研究歷史
克倫特羅是一種β-興奮劑,,添加于飼料中能提高幾種家畜包括豬的瘦肉率。
克倫特羅在家畜和人體內(nèi)吸收好,,而且與其它β-興奮劑相比,,它的生物利用度高,以至食用了含有克倫特羅的豬肉出現(xiàn)中毒,。Zimmer(1976)證實(shí)人內(nèi)服20 μg的14C-鹽酸克倫特羅,,峰濃度時(shí) ,血漿中克倫特羅原形藥占總的14C-鹽酸克倫特羅的75%,??藗愄亓_內(nèi)服生物利用度高的事實(shí)對估計(jì)消費(fèi)者食用了含有克倫特羅的組織,從中獲得的克倫特羅的量很重要,。引起人中毒的動(dòng)物組織含有克倫特羅原形藥的量差異很大,。Martinez-Navarro(1990)報(bào)道犢牛肝中克倫特羅原形藥的殘留量為161~291 ppb,Pulce等(1991)報(bào)道犢牛肝中克倫特羅的殘留量為375~500 ppb,,Salleras等(1995)報(bào)道犢牛肝中克倫特羅的殘留量為19~5395 ppb,。此外,Maistro等(1995)報(bào)道犢牛肌肉中克倫特羅的殘留量為500 ppb,。
1ppm的克倫特羅添加于豬飼料中用于促生長,,人食用豬肝或豬肺足夠引起中毒。世界沒有任何正規(guī)機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)克倫特羅作為飼料添加劑用于動(dòng)物促生長,。
毒理簡介
克倫特羅能激動(dòng)β2-受體,,對心臟有興奮作用,對支氣管平滑肌有較強(qiáng)而持久的擴(kuò)張作用,??诜筝^易經(jīng)胃腸道吸收。作平喘藥口服成人20-40μg/次,,3次/日,;兒童5歲以上5-20μg/次,3次/日,。人(女性)經(jīng)口TDLo: 4600 ng/kg,。小鼠靜脈LD50: 27600 ug/kg。
臨床表現(xiàn)
1.急性中毒有心悸,,面頸,、四肢肌肉顫動(dòng),有手抖甚至不能站立,頭暈,,乏力,,原有心律失常的患者更容易發(fā)生反應(yīng),心動(dòng)過速,,室性早搏,心電圖示S-T段壓低與T波倒置,。
2.原有交感神經(jīng)功能亢進(jìn)的患者,,如有高血壓、冠心病,、甲狀腺功能亢進(jìn)者上述癥狀更易發(fā)生,。
3.與糖皮質(zhì)激素合用可引起低血鉀,從而導(dǎo)致心律失常,。
4.反復(fù)使用會(huì)產(chǎn)生耐受性,,對支氣管擴(kuò)張作用減弱及持續(xù)時(shí)間縮短。雖然克倫特羅殘留的毒作用為輕度的,,但美國FDA研究表明,,應(yīng)用擬交感神經(jīng)藥者或?qū)η八庍^敏者,對克倫特羅的反應(yīng)要比正常健康個(gè)體更為嚴(yán)重,。
FDA擔(dān)心非法應(yīng)用克倫特羅可導(dǎo)致此藥的生產(chǎn)工人患病或死亡,。FDA指出,職業(yè)性吸入克倫 特羅對心血管的影響,,可能要比經(jīng)食品攝食的危害性更大,,但有待于進(jìn)一步的證實(shí)。
急救治療
1.口服后即洗胃,、輸液,,促使毒物排出。
2.在心電圖監(jiān)測及電解質(zhì)測定下,,使用保護(hù)心臟藥物如6-二磷酸果糖(FDP)及β1-受體阻滯劑倍他樂克,。
識別和預(yù)防
識別方法
(1)看該豬肉是否具有脂肪(豬油),,如該豬肉在皮下就是瘦肉或僅有少量脂肪,,則該豬肉就存在含有“ 瘦肉精”的可能。
(2)喂過“瘦肉精”的瘦肉外觀特別鮮紅,后臀較大,,纖維比較疏松,,切成二三指寬的豬肉比較軟,不能立于案,,瘦肉與脂肪間有黃色液體流出,脂肪特別?。欢话憬】档氖葚i肉是淡紅色,,肉質(zhì)彈性好,,瘦肉與脂肪間沒有任何液體流出,。
(3)購買時(shí)一定看清該豬肉是否有蓋有檢疫印章和檢疫合格證明。
預(yù)防方法
1.控制源頭,加強(qiáng)法規(guī)的宣傳,,禁止在飼料中摻入瘦肉精。
2.加強(qiáng)對上市豬肉的檢驗(yàn),。
3.消費(fèi)者購買豬肉時(shí)要揀帶些肥膘(1-2cm)的肉,,顏色不要太鮮紅,豬內(nèi)臟因瘦肉精殘留量多不宜食用,。
其它相關(guān)
用量規(guī)定
許多化學(xué)物質(zhì)被稱為瘦肉精,其中培林(雷托巴胺,,萊克多巴胺 ,,Ractopamine)毒性極低、代謝快速(無累積性),,因此被美國等國家允許添加入豬飼料,,日本也允許使用培林(Ractopamine)的豬肉進(jìn)口。目前*有美國等24國開放使用培林,,有160多國仍禁用,。