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所有產(chǎn)品僅供科研使用,,不能用于食用和醫(yī)療等
產(chǎn)品名稱: | 大鼠脂聯(lián)素(ADP) ELISA試劑盒 | |
樣品形式: | 血清/血漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清/其它生物液體/組織等(具體情況請(qǐng)咨詢) | |
品牌: | GENOMIC,R&D,ABCAM,CAYMAN等 | |
有效期: | 六個(gè)月 | |
保存與運(yùn)輸: | 2到8℃ | |
應(yīng)用范圍: | 科研用檢測(cè)試劑 | |
供貨商: | 上海信帆生物科技有限公司 | |
上海信帆銷售ELISA試劑盒,,全程提供技術(shù)指導(dǎo),,提供售后服務(wù)。
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大鼠脂聯(lián)素(ADP) ELISA試劑盒 | ||
操作步驟 | ||
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 | ||
8 nmol/L 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | ||
4 nmol/L 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | ||
2 nmol/L 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | ||
1 nmol/L 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | ||
0.5 nmol/L 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | ||
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同),、標(biāo)準(zhǔn)孔、 | ||
待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl, | ||
然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡 | ||
量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,。 | ||
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘,。 | ||
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用 | ||
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,,如此重復(fù)5 次,,拍干。 | ||
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外,。 | ||
7. 溫育:操作同3。 | ||
8. 洗滌:操作同5,。 | ||
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色 | ||
10 分鐘. | ||
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 | ||
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。 | ||
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大鼠脂聯(lián)素(ADP) ELISA試劑盒 | ||
操作程序總結(jié): | ||
計(jì)算 | ||
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),,OD 值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的 | ||
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計(jì)算出標(biāo) | ||
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,,計(jì)算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù), | ||
即為樣品的實(shí)際濃度,。 | ||
注意事項(xiàng) | ||
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未 | ||
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。 | ||
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。 | ||
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間 | ||
控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。 | ||
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD 值 | ||
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD 值),,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì) | ||
算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。 | ||
5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染。 | ||
6.底物請(qǐng)避光保存,。 | ||
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn). | ||
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 | ||
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。 | ||
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大鼠脂聯(lián)素(ADP) ELISA試劑盒 | ||
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