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所有產(chǎn)品僅供科研使用，不能用于食用和醫(yī)療等

大鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)ELISA試劑盒

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)水平,。用純化的 大鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)抗體包被微孔板,，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次 加入谷胱甘肽過氧化物酶(GPX),，再與 HRP 標(biāo)記的谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)抗體結(jié)合,，形 成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色,。TMB 在 HRP 酶的催化 下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的谷胱甘肽過氧化 物酶(GPX)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算 樣品中大鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)濃度。

大鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)ELISA試劑盒試劑盒組成

標(biāo)本要求

1．標(biāo)本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能 馬上進行試驗,，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

大鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)ELISA試劑盒操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀 釋。

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）,、標(biāo)準(zhǔn)孔、

待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,， 然后再加待測樣品 10μl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡 量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。

3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。

4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去,，如此

重復(fù) 5 次,，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,，空白孔除外,。

7. 溫育：操作同 3。

8. 洗滌：操作同 5,。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl,，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色

15 分鐘.

10.  終止：每孔加終止液 50μl,，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.  測定：以空白空調(diào)零,，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）,。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。

大鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)ELISA試劑盒計算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),，OD  值為縱坐標(biāo),，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的

OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計算出標(biāo)

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD 值代入方程式,，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù)， 即為樣品的實際濃度,。

注意事項

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未 用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間 控制在 5 分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD 值 大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定,，計 算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。

6．底物請避光保存,。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10.  如與英文說明書有異,，以英文說明書為準(zhǔn),。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：；2-8℃,。

2．有效期：6 個月

大鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)ELISA試劑盒