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所有產(chǎn)品僅供科研使用,，不能用于食用和醫(yī)療等

大鼠糖皮質(zhì)激素受體（GR）ELISA試劑盒

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠糖皮質(zhì)激素受體（GR）水平。用純化的大 鼠糖皮質(zhì)激素受體（GR）抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入 糖皮質(zhì)激素受體（GR），再與 HRP 標記的糖皮質(zhì)激素受體（GR）抗體結(jié)合,，形成抗體-抗 原-酶標抗體復合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍 色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的糖皮質(zhì)激素受體（GR）呈 正相關(guān)。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，通過標準曲線計算樣品中大鼠糖 皮質(zhì)激素受體（GR）濃度,。

大鼠糖皮質(zhì)激素受體（GR）ELISA試劑盒試劑盒組成

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應盡快進行實驗,。若不能 馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融

2．不能檢測含 NaN3 的樣品,，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 操作步驟

1.    標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。

 2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）,、標準孔,、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,，然后再加待測樣品 10µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡 量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。

3.    溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。

4.    配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.    洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去,，如此

重復 5 次,，拍干。

6.    加酶：每孔加入酶標試劑 50µl,，空白孔除外,。

7.    溫育：操作同 3,。

8.    洗滌：操作同 5。

9.    顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl,，再加入顯色劑 B50µl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

10 分鐘.

10.  終止：每孔加終止液 50µl,，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。

11.  測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）,。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行,。

計算

以標準物的濃度為橫坐標，OD  值為縱坐標,，在坐標紙上繪出標準曲線,，根據(jù)樣品的

OD 值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標準物的濃度與 OD 值計算出標 準曲線的直線回歸方程式,，將樣品的 OD 值代入方程式，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù),，

即為樣品的實際濃度。

注意事項

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未 用完,，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間 控制在 5 分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD 值 大于標準品孔*孔的 OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定,，計 算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。

6．底物請避光保存,。

7．嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。

9．本試劑不同批號組分不得混用,。

 保存條件及有效期

 1．試劑盒保存：；2-8℃,。

2．有效期：6 個月