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實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RealTime PCR)技術(shù)服務(wù)
實(shí)時(shí)熒光定量PCR 技術(shù)即是在PCR 反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),,利用熒光信號實(shí)時(shí)監(jiān)測
整個(gè)PCR 進(jìn)程,,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。實(shí)時(shí)熒光定量PCR 避免
了傳統(tǒng)PCR 以終產(chǎn)物檢測定量產(chǎn)生的偏差,提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性,。該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)
胞mRNA 表達(dá)量的變化,;比較不同組織的 mRNA 表達(dá)差異;驗(yàn)證基因芯片,,siRNA 干擾的實(shí)驗(yàn)
結(jié)果等,。
SYBR Green 熒光染料法
SYBR Green 是一種DNA 結(jié)合染料,能非特異地?fù)饺氲诫p鏈DNA 中去,。在游離狀態(tài)下,,它不發(fā)出熒光,
但一旦結(jié)合到雙鏈DNA 中以后,,便可以發(fā)出熒光,。它的zui大優(yōu)點(diǎn)就是可以與任意引物、模板相配合,,用
于任意反應(yīng)體系中,。從經(jīng)濟(jì)角度考慮,它也比其它的探針的價(jià)格要便宜得多,。但由于它能與所有的雙鏈DNA
結(jié)合,,所以一旦反應(yīng)體系中出現(xiàn)非特異擴(kuò)增,那它就會(huì)影響到定量結(jié)果的可靠性與重復(fù)性,。要避免這種不
利因素,,可以通過選擇良好的引物并優(yōu)化反應(yīng)條件以消除非特異性影響。
TaqMan 熒光探針法
PCR 擴(kuò)增時(shí)在加入一對引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針,,該探針為一寡核苷酸,,兩端分別標(biāo)記
一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí),,報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收,;PCR 擴(kuò)
增時(shí),Taq 酶的5-3外切酶活性將探針酶切降解,,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,,從而熒光監(jiān)測系
統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴(kuò)增一條DNA 鏈,,就有一個(gè)熒光分子形成,,實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR 產(chǎn)
物形成*同步。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測
項(xiàng)目 | 經(jīng)銷商(元) | 終端(元 ) | 說明 |
引物設(shè)計(jì)合成 | 200元/對 | 300元/對 | 客戶提供基因名稱(中英文全稱),。 |
RT-PCR 檢測(普通電泳PCR) | 60元/樣本/指標(biāo) | 100元/樣本/指標(biāo) | 包括所有試劑,,提供分析數(shù)據(jù)、步驟。 |
實(shí)時(shí)熒光定量(Taqman探針法) | 120元/樣本/指標(biāo) | 200元/樣本/指標(biāo) | 包括所有試劑,,提供分析數(shù)據(jù),,、步驟(20例起) |
SYBR Green 染料法 | 60元/樣本/指標(biāo) | 120元/樣本/指標(biāo) | 包括所有試劑,、提供數(shù)據(jù),、圖、實(shí)驗(yàn)步驟,。 |
實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測
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