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所有產(chǎn)品僅供科研使用,，不能用于食用和醫(yī)療等

人鐵蛋白（FE）ELISA試劑盒結(jié)果判定 

定性測定 
定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標(biāo)本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,，分別用"陽性"、"陰性"表示,。"陽性"表示該標(biāo)本在該測定系統(tǒng)中有反應(yīng),。"陰性"則為無反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,，即用滴度來表示反應(yīng)的強(qiáng)度,，其實(shí)質(zhì)仍是一個定性試驗(yàn)。在這種半定量測定中,，將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn),，呈陽性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,，可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱,，這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽性、弱陽性更具定量意義,。 在間接法和夾心法ELSIA中,，陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,，陰性孔呈色深于陽性孔,。兩類反應(yīng)的結(jié)果判斷方法不同,，分述于下。
（1） 間接法和夾心法 
這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷,。目視標(biāo)本也無色或近于無色者判為陰性,，顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中,，正?？蒲醒宸磻?yīng)后常可出現(xiàn)呈色的本底,，此本底的深淺因試劑的組成和實(shí)驗(yàn)的條件不同而異,，因此實(shí)驗(yàn)中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物（見3.6）,。在用肉眼判斷結(jié)果時(shí),，更宜用顯色深于陰性對照作為標(biāo)本陽性的指標(biāo)。目視法簡捷明了,，但頗具主觀性,。在條件許可下，應(yīng)該用比色計(jì)測定吸光值,，這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù),。先讀出標(biāo)本（sample，S）,、陽性對照（P）,、和陰性對照（N）的吸光值，然后進(jìn)行計(jì)算,。計(jì)算方法有多種,，大致可分為陽性判定值法和標(biāo)本與陰性對照比值法兩類。
a． 陽性判定值 
陽性判定值（cut-off value）一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù),，以此作為判斷結(jié)果陽性或陰性的標(biāo)準(zhǔn),。用此法判斷結(jié)果要求實(shí)驗(yàn)條件十分恒定，試劑的制備必須標(biāo)準(zhǔn)化,，陽性和陰性的對照品應(yīng)符合一定的規(guī)格,，須配用精密的儀器，并嚴(yán)格按規(guī)定操作,。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對大量標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)檢測而得到的?，F(xiàn)舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿,，陽性對照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng/ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個陽性對照和3個陰性對照,。測得A值后,，先計(jì)算陰性對照A值的平均數(shù)（NCX）和陽性對照A值的平均數(shù)（PCX）,，兩個平均數(shù)的差（P-N）必須大于一個特定的數(shù)值（例0.400），試驗(yàn)才有效,。3個陰性對照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,，并≤1.5×NCX，如其中之一超出此范圍,，則棄去,，而已另兩個陰性對照重新計(jì)算NCX；如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,，則該次實(shí)驗(yàn)無效,。陽性判定值按下式計(jì)算： 
陽性判定值=NCX+0.05 標(biāo)本A值＞陽性判定值的為陽性，小于陽性判定值的為陰性,。應(yīng)注意的是,，式中0.05為該試劑盒的常數(shù)，只適合于該特定條件下,，而不是對各種試劑均可通用,。
根據(jù)以上敘述可以看出，在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗(yàn)的質(zhì)控作用,，試劑變質(zhì)和操作不當(dāng)均會產(chǎn)生"試驗(yàn)無效"的后果,。
b.標(biāo)本/陰性對照比值 
在實(shí)驗(yàn)條件（包括試劑）較難保證恒定的情況下，這種判斷法較為合適,。在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的A值后,，計(jì)算S/N值。也有寫作P/N的,，這里的P不代表陽性（positive）,，而是樣本（patient）的縮寫，不應(yīng)誤解,。為避免混淆,，更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,，有些作者定出S/N為陽性標(biāo)準(zhǔn),，現(xiàn)多為各種測定所沿用。實(shí)際上每一測定系統(tǒng)應(yīng)該用實(shí)驗(yàn)求出各自的S/N的閾值,。更應(yīng)注意的是,，N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的科研血清。有的試劑盒中所設(shè)陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,，以致反應(yīng)后產(chǎn)生的本底可能較正?？蒲醒宓谋镜椎偷枚唷Ｒ虼?，這類試 
b. 抑制率法 
抑制率表示標(biāo)本在競爭結(jié)合中標(biāo)本對陰性反應(yīng)顯色的抑制程度,，按下式計(jì)算：抑制率（%）= （陰性對照A值-標(biāo)本A值）×*/陰性對照A值.一般規(guī)定抑制率≥50%為陽性,，＜50%為陰性。
定量測定 
ELSIA操作步驟復(fù)雜,，影響反應(yīng)因素較多,，特別是固相載體的包被難達(dá)到各個體之間的*，因此在定量測定中,，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬,，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0,，繪制時(shí)常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo),，以吸光度為縱坐標(biāo),，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形,，其頭,、尾部曲線趨于平坦，*較呈直線的部分是的檢測區(qū)域,。

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