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所有產(chǎn)品僅供科研使用,，不能用于食用和醫(yī)療等

小鼠腺病毒抗體（ADV Ab）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。
                                                                       96T 
 
使用目的： 本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清,、血漿及相關(guān)液體樣本中腺病毒抗體（ADV Ab）表達(dá),。
實(shí)驗(yàn)原理 本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠腺病毒抗體（ADV Ab）表達(dá)。用純化的抗原包
被微孔板,，制成固相抗原,，可與樣品中腺病毒抗體（ADV Ab）相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合
的抗原和其他成分后再與 HRP 標(biāo)記的抗原結(jié)合,，形成抗原 抗體 酶標(biāo)抗原復(fù)合物,，經(jīng)過徹
底洗滌后加底物TMB顯色,。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成
zui終的黃色,。用酶標(biāo)儀在 450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值）,，與 CUTOFF值相比較，從而
判定標(biāo)本中小鼠腺病毒抗體（ADV Ab）的存在與否,。
試劑盒組成 1  30 倍濃縮洗滌液  20ml×1 瓶  7  終止液  6ml×1 瓶
2  酶標(biāo)試劑  6ml×1 瓶  8  陽(yáng)性對(duì)照  0.5ml×1 瓶
3  酶標(biāo)包被板  12 孔×8 條  9  陰性對(duì)照  0.5ml×1 瓶
4  樣品稀釋液  6ml×1 瓶  10  說明書  1 份
5  顯色劑A 液  6ml×1 瓶  11  封板膜  2 張   
6  顯色劑 B液  6ml×1/瓶  12  密封袋 1 個(gè)
小鼠腺病毒抗體（ADV Ab）酶聯(lián)免疫分析試劑盒標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于 20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品,，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
小鼠腺病毒抗體（ADV Ab）酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟 
1.  編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔,、陽(yáng)性對(duì)照2 孔,、空白對(duì)照 1
孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
 
 
2.  加樣：分別在陰,、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照,、陽(yáng)性對(duì)照 50"l。然后在待測(cè)樣品孔先
加樣品稀釋液 40"l,，然后再加待測(cè)樣品 10"l,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不
觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻,，
3.  溫育：用封板膜封板后置37℃溫育 30 分鐘。   
4.  配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.  洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置 30 秒后棄去,，如此
重復(fù) 5次，拍干,。
6.  加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50"l,，空白孔除外。 
7.  溫育：操作同 3,。 
 
8.  洗滌：操作同 5,。
9.  顯色：每孔先加入顯色劑 A50"l，再加入顯色劑 B50"l,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色
10 分鐘.
10.  終止：每孔加終止液 50"l,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.  測(cè)定：以空白空調(diào)零,，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止
液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。 
 
 
操作程序總結(jié)： 
 
 
 
計(jì)算和結(jié)果判定： 
   試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10
   臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
   陰性判定：樣品OD 值<  臨界值（CUT OFF）者為小鼠腺病毒抗體（ADV Ab）陰性
   陽(yáng)性判定：樣品OD 值≥  臨界值（CUT OFF）者為小鼠腺病毒抗體（ADV Ab）陽(yáng)性
,。 
注意事項(xiàng)
1．操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,，本試劑不同批號(hào)組分不得混用。 
 
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15 30 分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
3．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
4． 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。
5．底物請(qǐng)避光保存。
6．試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),，使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)，參考波長(zhǎng)為 630nm
7．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。終止液為 2M 的硫酸，使用時(shí)必須
注意安全,。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：,；2 8℃。
2．有效期：6個(gè)月 
   

 
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