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當前位置:> 供求商機> 小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒
所有產(chǎn)品僅供科研使用,,不能用于食用和醫(yī)療等
Chinese Name/中文名 | 小鼠S100蛋白(S-100)ELISA Kit |
English Name/英文名 | Mouse Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit |
Catalog Number/目錄號 |
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Organism/種屬 | 小鼠 |
Packing/規(guī)格 | 96T/Kit(8*12strips)/ 48T/Kit(8*6strips) |
Detection Range/檢測范圍 | 0.31-20ng/mL |
Sensitivity/靈敏度 | 0.19ng/mL |
Method/檢測方法 | Sandwich-ELISA/雙抗體夾心ELISA |
Sample Type/樣品類型 | Serum, Plasma, Other biological fluids/血清、血漿等其它生物樣品 |
Other Names/其他名稱 |
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問題1:如果我們檢測的樣本是組織樣本,請問應該選用什么來組織勻漿,濃度是多少? | |||||||
答:一般我們試劑盒的組織勻漿,,都是按照10%進行勻漿,即1g組織加9ml的勻漿液,,勻漿液可以選取sheng理鹽水,也可以選取PBS,但*是PBS,PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol. | |||||||
問題2:請問我訂購了你們的試劑盒,,但是樣本是分批次收集的,,我可以分批次實驗嗎。 | |||||||
答:可以的,,我們的試劑盒橫條是可拆卸的,,試劑盒使用之后放到2-8度冰箱保存,下次可以繼續(xù)使用,,但是建議是拆封之后一個月內用完,。 | |||||||
問題3:請問各種標本的處理方式,你可以發(fā)給我一下嗎,? | |||||||
答:當然可以,。標本要求如下: | |||||||
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當天就進行檢測的樣本,,及時儲存在4℃?zhèn)溆谩τ诟籼煸贆z測的樣本,,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。標本應避免反復凍融?/span> | |||||||
液體類標本: 包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等,。 | |||||||
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應再次離心。 | |||||||
2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,,應該再次離心。 | |||||||
3.尿液:用無菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心,。胸腹水、腦脊液參照此實行,。 | |||||||
4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清。 | |||||||
5.培養(yǎng)細胞:檢測細胞內的成份時,,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,,以使細胞破壞并放出細胞內成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心。 | |||||||
6.組織標本:切割標本后,,稱取重量,。加入一定量的PBS,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),,或組織蛋白萃取試劑,,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用,。 | |||||||
7.標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融. | |||||||
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。 |
組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板:兩塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,,然后反復顛倒/搓動以助溶解,,其濃度為1,600 pg/ml,將其稀釋為400 pg/ml后,,再做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),,分別稀釋成400 pg/ml,200 pg/ml,,100 pg/ml,,50 pg/ml,25 pg/ml,,12.5 pg/ml,,6.25 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,,臨用前15分鐘內配制,。如配制200 pg/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,,其余濃度以此類推,。
3.樣品稀釋液:1×20ml。
4.檢測稀釋液A:1×10ml,。
5.檢測稀釋液B:1×10ml,。
6. 檢測溶液A:1×120μl(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100μl/孔),,實際配制時應多配制0.1-0.2ml,。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,,在使用前一小時內配制,。
7. 檢測溶液B:1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A,。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶,。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4),。
11. 覆膜:5張
12. 使用說明書:1份
自備物品
1. 酶標儀(建議參考儀器使用說明提前預熱)
2. 微量加液器及吸頭,EP管
3. 蒸餾水或去離子水,,全新濾紙
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