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1. 預(yù)包被板	48T/96T;	6. 樣本稀釋液（5號液）	1支;
2. 酶結(jié)合物（1號液）	1支;	7. 終止液（6號液）	1支;
3. 洗滌液（2號液）	1支;	8. 陽性對照品	1支;
4. 底物（3號液）	1支;	9. 陰性對照品	1支;
5. 顯色劑（4號液）	1支;	10.使用說明書	1份;

問題1：如果我們檢測的樣本是組織樣本,，請問應(yīng)該選用什么來組織勻漿,濃度是多少?
答：一般我們試劑盒的組織勻漿，都是按照10%進(jìn)行勻漿,即1g組織加9ml的勻漿液,，勻漿液可以選取sheng理鹽水,，也可以選取PBS,但*是PBS,PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol.
問題2：請問我訂購了你們的試劑盒，但是樣本是分批次收集的,，我可以分批次實(shí)驗(yàn)嗎,。
答：可以的,，我們的試劑盒橫條是可拆卸的，試劑盒使用之后放到2-8度冰箱保存,，下次可以繼續(xù)使用,，但是建議是拆封之后一個月內(nèi)用完。
問題3：請問各種標(biāo)本的處理方式,，你可以發(fā)給我一下嗎,？
答：當(dāng)然可以。標(biāo)本要求如下：
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本，及時儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本,，及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,，-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
液體類標(biāo)本: 包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等,。
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,，保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心。
2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心,。
3.尿液：用無菌管收集,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,，保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行,。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。
5.培養(yǎng)細(xì)胞：檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。
6.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量,。加入一定量的PBS,，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑,，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
8.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

人生長因子（HGH）ELISA Kit操作程序

加樣反應(yīng)：取出所需量的反應(yīng)板條,，每孔加樣本稀釋液（5號液）2滴，再分別加入待檢的血清樣本10ul，混勻,。同時設(shè)陰性,、陽性及空白對照各一孔；陰性,、陽性對照不用再稀釋,，直接加樣100ul即可，空白對照孔僅加入樣本稀釋液（5號液）2滴,。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,，每孔加洗滌液（2號液）1滴，立即用蒸餾水注滿,，靜置30秒后甩去,，再直接用蒸餾水洗滌四次，甩去,，拍干,。
加酶反應(yīng)：除空白對照孔外其余每孔加酶結(jié)合物（1號液）2滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體,，如上洗滌,，拍干。
顯色反應(yīng)：加底物（3號液）和顯色劑（4號液）各1滴,，混勻,，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液（6號液）1滴,，混勻,，終止反應(yīng)（加終止液后藍(lán)色會變?yōu)辄S色）并判讀結(jié)果,。

人生長因子（HGH）ELISA Kit結(jié)果判斷

肉眼觀察：陰性對照接近無色,，陽性對照呈明顯黃色，表示試驗(yàn)有效,。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性,，待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。
儀器判斷：以空白對照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm（620nm作參比波長）讀取O.D值,，待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性,。當(dāng)陰性對照O.D值低于0.05時按0.05計算。

人生長因子（HGH）ELISA Kit注意事項(xiàng)

試劑盒在2-8℃下保存,，每次取出時先平衡至室溫后使用,。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊，各瓶蓋之間切不可混用,。各試劑盒之間不可混用,。
如陰陽對照為凍干品時，請先按標(biāo)示加入蒸餾水溶解后使用,。
洗滌時將蒸餾水加滿孔內(nèi),，每次停放三十秒鐘,，甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源,。
為提高試驗(yàn)的可比性,，建議使用儀器判讀結(jié)果。
如有條件,，使用水浴箱孵育,。

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