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苯基瓊脂糖凝膠
英文名稱:Phenyl-Berpharose FF
貨號:B2813
規(guī)格:1ml
1. 產(chǎn)品介紹
苯基-瓊脂糖凝膠FF是一種將苯基鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的較強(qiáng)疏水性疏水層析分離介質(zhì)。該產(chǎn)品保留了瓊脂糖極-好的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu),,與生物活性大分子有很好的相容性,具有載量高,、非特異性吸附少,、流速快等特點(diǎn),廣泛用于具有一定疏水性能的蛋白質(zhì),、多肽等生物大分子的實驗室規(guī)模制備和生物制藥,、生物工程的工業(yè)化制備,例如:重組人粒巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF),、粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF),、人集落刺激因子(M-CSF)、表皮生成因子(EGF)的生產(chǎn)以及單克隆抗體的純化,。
2.規(guī)格
1ml(預(yù)裝柱),、5ml(預(yù)裝柱)、10ml(預(yù)裝柱),、20ml,、100ml、500ml 使用方法
①平衡
用2~5個柱體積的初始緩沖溶液進(jìn)行平衡,,建議流速為100 cm/h,。
觀察檢測器的變化,,直到電導(dǎo)率、pH值等參數(shù)不變,。
②上樣
樣品的預(yù)處理:樣品需用0.45μm濾膜過濾,,在上樣,以免堵塞層析柱,。
上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進(jìn)行選擇,也可通過線性實驗找到良好上樣量,。
③淋洗
用2~3個柱體積的平衡緩沖液進(jìn)行淋洗,,觀察檢測器的變化,直到電導(dǎo)率,、pH值等參數(shù)基本不變,。
④洗脫
疏水層析柱的洗脫可用恒定洗脫、梯度洗脫或者階躍洗脫,。
一般推薦使用降低鹽濃度的梯度洗脫,,亦可根據(jù)實際情況添加有機(jī)溶劑進(jìn)行洗脫。
5.再生,、清洗,、保存
①凝膠再生
(1)用蒸餾水按操作流速沖洗3~5個柱體積,接著用平衡液清洗3~5個柱體積,。
(2)再生時若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)洗不掉,,可用在位清洗法除去。
②在位清洗
(1)去除強(qiáng)結(jié)合的蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì):1 M NaOH洗2個柱體積,,8 M尿素洗2個柱體積,, 30%異丙醇洗2個柱體積,平衡緩沖液洗2個柱體積,。
(2)去除內(nèi)毒素?zé)嵩? M NaOH清洗1~2 h,,速度50 cm/h。
(3)在位清洗可有效去除介質(zhì)上的雜質(zhì),,反向清洗效果更佳
6.注意事項:
1)使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致,,避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響純化效果,。
2)在常用水相緩沖液,、1M NaOH、8M尿素,、6M鹽酸胍,、70%乙醇中穩(wěn)定
3)本產(chǎn)品保存條件為20%乙醇,4~8℃,。
4)2-25℃,常壓,避光運(yùn)輸
苯基瓊脂糖凝膠
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