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辛基瓊脂糖凝膠
英文名稱:Octyl-Berpharose FF
貨號(hào):B2815
規(guī)格:5ml
1. 產(chǎn)品介紹
辛基-瓊脂糖凝膠FF是一種將辛基鍵合在瓊脂糖微球上形成的中等疏水性疏水層析分離介質(zhì),。該產(chǎn)品保留了瓊脂糖極-好的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu),,與生物活性大分子有很好的相容性,,具有離子交換容量高、非特異性吸附少,、流速快等特點(diǎn),,廣泛用于具有一定疏水性能的蛋白質(zhì)、多肽等生物大分子的實(shí)驗(yàn)室規(guī)模制備和生物制藥,、生物工程的工業(yè)化制備,,典型應(yīng)用如重組人粒巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF),、人集落刺激因子(M-CSF),、表皮生成因子(EGF)的生產(chǎn)以及單克隆抗體的純化。
2.規(guī)格
1ml(預(yù)裝柱),、5ml(預(yù)裝柱),、10ml(預(yù)裝柱)、20ml,、100ml,、500ml 使用方法
①平衡
用2~5個(gè)柱體積的初始緩沖溶液進(jìn)行平衡,建議流速為100 cm/h,。
觀察檢測(cè)器的變化,,直到電導(dǎo)率、pH值等參數(shù)不變,。
②上樣
樣品的預(yù)處理:樣品需用0.45μm濾膜過(guò)濾,,在上樣,,以免堵塞層析柱。
上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進(jìn)行選擇,,也可通過(guò)線性實(shí)驗(yàn)找到良好上樣量,。
③淋洗
用2~3個(gè)柱體積的平衡緩沖液進(jìn)行淋洗,觀察檢測(cè)器的變化,,直到電導(dǎo)率,、pH值等參數(shù)基本不變,。
④洗脫
疏水層析柱的洗脫可用恒定洗脫,、梯度洗脫或者階躍洗脫。
一般推薦使用降低鹽濃度的梯度洗脫,,亦可根據(jù)實(shí)際情況添加有機(jī)溶劑進(jìn)行洗脫,。
5.再生、清洗,、保存
①凝膠再生
(1)用蒸餾水按操作流速?zèng)_洗3~5個(gè)柱體積,,接著用平衡液清洗3~5個(gè)柱體積。
(2)再生時(shí)若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)洗不掉,,可用在位清洗法除去,。
②在位清洗
(1)去除強(qiáng)結(jié)合的蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì):1 M NaOH洗2個(gè)柱體積,8 M尿素洗2個(gè)柱體積,, 30%異丙醇洗2個(gè)柱體積,,平衡緩沖液洗2個(gè)柱體積。
(2)去除內(nèi)毒素?zé)嵩? M NaOH清洗1~2 h,,速度50 cm/h,。
(3)在位清洗可有效去除介質(zhì)上的雜質(zhì),反向清洗效果更佳
6.注意事項(xiàng):
1)使用時(shí)保證柱子和緩沖液的溫度一致,,避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡,,影響純化效果。
2)在常用水相緩沖液,、1M NaOH,、8M尿素、6M鹽酸胍,、70%乙醇中穩(wěn)定
3)本產(chǎn)品保存條件為20%乙醇,,4~8℃。
4)2-25℃,常壓,避光運(yùn)輸
5)僅供科研實(shí)驗(yàn)使用
辛基瓊脂糖凝膠
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