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(Ghose法) DNS試劑

【產(chǎn)品名稱(chēng)】：DNS試劑(Ghose法)

【產(chǎn)品規(guī)格】：500ml

【儲(chǔ)存條件】：2-8℃

【有效期】：12個(gè)月

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

Ghose法DNS試劑,。又稱(chēng)3,5-二硝基水楊酸法或簡(jiǎn)稱(chēng)DNS法,DNS試劑是植物總糖和還原糖檢測(cè)(硝基水楊酸法)的成分之一,定量檢測(cè)植物組織樣品中的總糖和還原糖的含量,。

檢測(cè)原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物,。在一定范圍內(nèi),，還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關(guān)系,。在540nm處測(cè)定棕紅色物質(zhì)的吸光度，該吸光度值與還原糖含量呈線(xiàn)性關(guān)系,。

操作步驟(僅供參考)：1,、 還原糖的提取：①稱(chēng)取植物樣品0.5~3g,，剪碎,，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中,，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次,，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。②50℃水浴30min,，并不時(shí)攪拌,，以便還原糖浸出。③將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至50ml離心管,，4000g離心5min,。④留取上清液，向沉淀中加入20ml蒸餾水,，混勻,，再次4000g離心5min。

⑤留取上清液,，將2次獲得的上清液合并,，用蒸餾水定容至100ml(提取液)，混勻,，作為還原糖待測(cè)液,。2、 總糖的水解和提?。孩俜Q(chēng)取植物樣品0.5~3g,，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿,，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中,，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器,。②向容器中加入10ml 6M鹽酸溶液,，攪拌均勻，煮沸30min,，并不時(shí)攪拌,。③取2滴滴加于載玻片上，滴加1滴顯色液，檢查水解是否,如已經(jīng)水解則不顯示藍(lán)色,。④水解完畢后,，冷卻至室溫，加入6M氫氧化鈉溶液,，使溶液pH至7.4左右,，用蒸餾水定容至100ml，混勻,，4000g離心5min或過(guò)濾,，獲得上清或?yàn)V液。⑤取上清或?yàn)V液10ml,，用蒸餾水定容至100ml,，成稀釋10倍的總糖水解液(提取液)，取1ml總糖水解液,，測(cè)定其還原糖的含量,。

注意事項(xiàng)：1、 該試劑避免反復(fù)凍融,，以免失效或效率下降,，盡量避光保存。2,、 稀釋鹽酸和氫氧化鈉溶液時(shí),，應(yīng)小心操作，避免傷人,。3,、 一般市售的濃鹽酸摩爾數(shù)約為11.6M，應(yīng)稀釋至6M后使用,。4,、 待測(cè)樣本如不能及時(shí)測(cè)定，應(yīng)置于2~8℃保存,，3天內(nèi)穩(wěn)定,。5、 如果樣品還原糖濃度過(guò)高,，應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測(cè),，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。6,、 總糖計(jì)算公式在測(cè)定干擾雜質(zhì)很少、還原糖含量相對(duì)總糖含量很少時(shí)使用,×0.9是為了從測(cè)定出的總糖水解成單糖中,，扣除水解時(shí)所消耗的水量,。

(Ghose法) DNS試劑