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小鼠免疫球蛋白M(IgM) 酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法,。用小鼠免疫球蛋白M(IgM)抗體包被于酶標板上,,實驗時標本或標準品中的IGG會與包被抗體結合,游離的成分被洗去,。依次加入生物素化的抗小鼠IGM抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素,。小鼠IGM抗體與結合在包被抗體上的小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒結合,、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去,。加入顯色底物,,TMB在辣根過氧化物酶的催化下現(xiàn)藍色,加終止液后變黃,。用酶標儀在450nm波長處測OD值,,小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線求出標本中小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒的濃度,。
標本收集:
血清:全血標本于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,,無內(nèi)毒素試管,。
血漿:抗凝劑推薦使用EDTA,標本采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,,取上清即可檢測,。避免使用溶血,高血脂標本,。
其它生物標本:1000×g離心20分鐘,,取上清即可檢測
標本應清澈透明,懸浮物應離心去除,。
標本收集后若不及時檢測,,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃/-80℃電冰箱內(nèi),,避免反復凍融,,6個月內(nèi)進行檢測,4℃保存的應在1周內(nèi)進行檢測。
如果樣本中檢測物濃度高于標準品zui高值,,請根據(jù)實際情況,,做適當倍數(shù)稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數(shù)),。
試驗所需自備物品:
酶標儀(450nm波長濾光片)
高精度移液器,,EP管及一次性吸頭:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水
吸水紙
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