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供應大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒
  • 供應大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒

貨物所在地:上海上海市

更新時間:2024-08-20 21:00:06

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所有產品僅供科研使用,,不能用于食用和醫(yī)療等

供應大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒
上海信帆生物是一家專業(yè)的elisa試劑盒供應商,銷售各種進口和國產品牌的elisa試劑盒。對于elisa試劑盒,我們提供完善的質量保證,專業(yè)的技術解答,耐心周到的售后服務,成為國內多家科研機構和高校的試劑盒供應商,。
本試劑盒含量是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質濃度的標準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將待測物質和生物素標記的抗體同時溫育,。洗滌后,,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,,去除未結合的酶結合物,,然后加入底物A、B,,和酶結合物同時作用,。產生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質的濃度呈比例關系
供應大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒
試劑樣本收集和處理方法
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本,,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,,-70℃凍存?zhèn)溆?。標本應避免反復凍融?/td>
液體類標本: 包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清等,。
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,,保存過程中如出現沉淀,應再次離心,。
2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,,應該再次離心,。
3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心,。胸腹水,、腦脊液參? 照此實行。
4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。
5.培養(yǎng)細胞:檢測細胞內的成份時,,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心,。
6.組織標本:切割標本后,,稱取重量,。加入一定量的PBS,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),,或組織蛋白萃取試劑,,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用,。
7.標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
8.不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
詳細操作步驟
1. 加樣:標準品設定5個濃度點10個孔,每個濃度設定平行孔,,加入50微升不同濃度的標準品,,空白孔設定1個孔加入50微升蒸餾水(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同),、待測樣品孔,,在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。
2. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
3. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復5次,拍干。
5. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,,空白孔除外,。
6. 溫育:操作同3。
7. 洗滌:操作同5,。
8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘. 
9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色),。
10. 測定:以空白空調零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行,。
試劑盒操作過程中有什么注意事項
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存,。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果,。
3. 各步加樣均應使用加樣器,,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內,,如標本數量多,推薦使用排槍加樣,。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用,。
11. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準。
計算方法
操作完成之后,詳細的計算方式是:以標準物的濃度為橫坐標,,OD值為縱坐標,,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,;再乘以稀釋倍數,;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度,。
大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒
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