(Ghose法) DNS試劑

【產(chǎn)品名稱】：DNS試劑(Ghose法)

【產(chǎn)品規(guī)格】：500ml

【儲存條件】：2-8℃

【有效期】：12個月

產(chǎn)品簡介：

Ghose法DNS試劑,。又稱3,5-二硝基水楊酸法或簡稱DNS法,DNS試劑是植物總糖和還原糖檢測(硝基水楊酸法)的成分之一,定量檢測植物組織樣品中的總糖和還原糖的含量。

檢測原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物,。在一定范圍內(nèi)，還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關(guān)系,。在540nm處測定棕紅色物質(zhì)的吸光度,，該吸光度值與還原糖含量呈線性關(guān)系。

操作步驟(僅供參考)：1,、 還原糖的提?。孩俜Q取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿,，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中,，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器,。②50℃水浴30min,，并不時攪拌，以便還原糖浸出,。③將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至50ml離心管,，4000g離心5min。④留取上清液,，向沉淀中加入20ml蒸餾水,，混勻，再次4000g離心5min,。

⑤留取上清液,，將2次獲得的上清液合并，用蒸餾水定容至100ml(提取液),，混勻,，作為還原糖待測液。2,、 總糖的水解和提?。孩俜Q取植物樣品0.5~3g，剪碎,，加入蒸餾水約3ml勻漿,，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次,，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器,。②向容器中加入10ml 6M鹽酸溶液，攪拌均勻,，煮沸30min,，并不時攪拌。③取2滴滴加于載玻片上,，滴加1滴顯色液,，檢查水解是否,如已經(jīng)水解則不顯示藍(lán)色。④水解完畢后,，冷卻至室溫,，加入6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH至7.4左右,，用蒸餾水定容至100ml,，混勻,，4000g離心5min或過濾，獲得上清或?yàn)V液,。⑤取上清或?yàn)V液10ml,，用蒸餾水定容至100ml，成稀釋10倍的總糖水解液(提取液),，取1ml總糖水解液，測定其還原糖的含量,。

注意事項(xiàng)：1,、 該試劑避免反復(fù)凍融，以免失效或效率下降,，盡量避光保存,。2、 稀釋鹽酸和氫氧化鈉溶液時,，應(yīng)小心操作,，避免傷人。3,、 一般市售的濃鹽酸摩爾數(shù)約為11.6M,，應(yīng)稀釋至6M后使用。4,、 待測樣本如不能及時測定,，應(yīng)置于2~8℃保存，3天內(nèi)穩(wěn)定,。5,、 如果樣品還原糖濃度過高，應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測,，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù),。6、 總糖計算公式在測定干擾雜質(zhì)很少,、還原糖含量相對總糖含量很少時使用,×0.9是為了從測定出的總糖水解成單糖中,，扣除水解時所消耗的水量。

(Ghose法) DNS試劑