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六胺銀染色實驗代測
六胺銀染色簡介:
六胺銀染色是一種經典顯示基底膜的方法,。經過改良之后,組織經鉻酸氧化,使真菌內的黏多糖暴露出醛基,,醛基把六胺銀還原為黑色的金屬銀,。氯化金可使金屬銀轉變?yōu)楦€(wěn)定的金屬金,同時使背景更清晰,。海波可以固定并洗去未還原的銀離子,。
六胺銀染色實驗步驟(僅供參考):
1、六胺銀固定于甲醛固定液中,,常規(guī)脫水包埋,。切片4微米,脫蠟至水洗,。
2,、切片入氧化劑氧化20分鐘。流水稍洗,。
3,、入漂白液處理1分鐘,以除去氧化劑,。
4,、流水沖洗5分鐘,蒸餾水浸洗2次,,每次30秒至60秒,。
5、切片放入配制好的預熱至60度的六胺銀工作液中,,加蓋60度恒溫染色大約20至60分鐘,,切片呈淡黃色即取出經水洗后顯微鏡觀察是否有菌體出現,。如有淡棕色菌體出現,應每隔5到10分鐘觀察一次以控制菌體著色深淺,,直至顯色理想,;
6、入蒸餾水中清洗,。
7,、用氯化金溶液調色1到2分鐘。蒸餾水洗1到2分鐘,。
8,、置于海波溶液2分鐘。流水沖洗5分鐘,。
9,、滴加橙黃G一小滴復染1秒即用水沖洗。染色時間不能過長,,否則將影響最終效果,。
10、流水沖洗20秒-60秒,。
11,、常規(guī)脫水,二甲苯透明,,中性樹膠封固,。染色完成。
染色結果:真菌黑色,,背景淺紅色
六胺銀染色實驗代測
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