普魯士藍染色實驗代測

普魯士藍染色簡介：

在酸性條件下,，切片內的高鐵鹽與亞鐵作用生成亞鐵氰化鐵（普魯士藍反應）,。

鐵反應是用來鑒別組織或細胞內出現(xiàn)的黃棕色色素是屬于哪一種色素,，入黑色素,、脂褐素,、甲醛色素還是含鐵血黃素,。

染色步驟（僅供參考）：

1、石蠟切片脫蠟至水,；

2,、蒸餾水洗兩次；

3,、取等量2%亞鐵氫化鉀和2%鹽酸混合,，染色30~45min；

4,、蒸餾水洗,，0.1%核固紅復染3min（染液用一段時間后調整為5min）；

5,、無水乙醇脫水（兩缸各5分鐘）,；

6、正丁醇30s,；

7,、二甲苯透明（兩缸各5min）， 中性樹膠封片（封片過程中保證組織上的二甲苯不能干,，否則在高倍顯微鏡下觀察易出現(xiàn)小水珠結晶）,。

染色結果：

含鐵血黃素呈藍色，胞核呈紅色,。

注意事項：

1,、組織應采用緩沖中性甲醛液固定，若用一般的甲醛液,，則應作短時間固定后即包埋切片,，經(jīng)甲醛液固定的組織反應不良。

2,、鹽酸以分析純較好,，因粗制鹽酸內含有較多的鐵，可導致假陽性,。

3,、在操作過程中容器要干凈，避免使用鐵制工具（可用不繡鋼制工具）,。

4,、鐵反應前的各步驟以蒸餾水沖洗，以防自來水內的鐵離子與組織內的鈣鹽結合產(chǎn)生假陽性反應,。

5,、制作對照片時，取另一張相同連續(xù)切片脫蠟至水,，置入5%的草酸中作用2~6小時,，即可將含鐵血黃素溶去,，再染普魯士藍，鐵反應陰性,。

普魯士藍染色實驗代測