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LFB染色實驗代測

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更新時間:2024-10-26 15:57:46瀏覽次數(shù):893次

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LFB染色實驗代測
實驗樣本類型:石蠟切片
主要用途:觀察神經(jīng)髓鞘的形態(tài)及變化
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LFB染色實驗代測

LFB染色介紹:

勞克堅牢藍(lán)(Luxol fast blue,,簡稱LFB),,是對皮膚組織神經(jīng)中髓鞘,,腦,,脊髓,,(藍(lán)色,背景紅色)進(jìn)行染色,。

LFB染色實驗步驟(僅供參考):

1,、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ10min-無水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。

2,、染色:切片置于0.1% LFB染液60℃孵育過夜,,自來水沖洗;

3,、分化:切片放入70%乙醇中(無固定時間),;切片浸入0.05% *中,鏡下控制分色時間至分色*(可見灰質(zhì)部分顏色變淡),;如分化不好這兩步交替進(jìn)行幾次至鏡檢滿意,,水洗;

4,、伊紅復(fù)染:0.1%伊紅復(fù)染1min,,水洗;

5,、封片:電吹風(fēng)吹干或烘箱吹干,;二甲苯透明數(shù)分鐘,中性樹膠封片,。

6,、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析,。

染色結(jié)果:神經(jīng)髓鞘呈藍(lán)色,;其他成分呈紅色。

 

注意事項:

1,、染色前,,固藍(lán)溶液需要預(yù)熱,,染液溫度會對標(biāo)本著色強(qiáng)弱有一定影響。
2,、70%的酒精和0.05%*分化可以反復(fù)進(jìn)行,,直至灰質(zhì)變?yōu)闊o色或者淡藍(lán)色,。
3,、固藍(lán)染完冷卻從固藍(lán)拿出后,需要盡快分化,,玻片不能長時間放在水中也不能長時間放在外面使組織干掉,。在水中浸泡時間過長,固藍(lán)的顏色會掉,,會導(dǎo)致染色特異性不明顯,;組織干了,會導(dǎo)致再分化時,,分化不均勻,。

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