鍍銀染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)

鍍銀染色實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介：

鍍銀染色改良bielschowsky法,。鍍銀染色主要染神經(jīng)軸突,，神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)原纖維，神經(jīng)原纖維纏結(jié),，老年斑呈黑色,，背景金黃色。常用于研究老年性癡呆等神經(jīng)細(xì)胞原纖維的病理改變,，了解神經(jīng)纖維有無(wú)變性,，破壞的程度。

鍍銀染色實(shí)驗(yàn)步驟（僅供參考）：

1,、 石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無(wú)水乙醇Ⅰ10min-無(wú)水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗,。

2、硝酸-銀反應(yīng)：切片浸入20%硝酸-銀加蓋于暗處反應(yīng)20min,。

3,、蒸餾水洗（在此期間配制銀氨溶液）：染色第2步用過(guò)的20%硝酸-銀，逐滴加入氫氧化銨,，邊滴邊攪拌,，直到開(kāi)始形成的白色沉淀又消失，銀液變清即為銀氨溶液,。

4,、 銀氨液處理：切片浸入銀氨液作用15min（在此期間配制稀氨水，銀氨液用于下步配制顯影工作液）,。稀氨水配制：蒸餾水30ml加氫氧化銨3滴,。

5、 稀氨水中浸泡：切片移入稀氨水中浸泡（在此期間配制顯影工作液）,。

顯影儲(chǔ)備液：甲醛液20ml+蒸餾水100ml+硝酸1滴+檸檬酸0.5g,。

顯影工作液：取第4步用過(guò)的銀氨液30ml，加入顯影儲(chǔ)備液3滴,，混合均勻,，即配即用不能保存。

6,、 顯色：切片浸入顯影工作液中顯色,，約3-7min,，鏡下控制顯色，金黃色的背景,，神經(jīng)纖維呈黑色時(shí)即取出,。切片浸入第5步用過(guò)的稀氨水中浸泡1min。流水沖洗1min,。

7,、 去除未反應(yīng)的銀離子：5%硫代硫-酸鈉處理2min（固定已反應(yīng)的銀鹽和除去未反應(yīng)的銀離子）。流水沖洗5min,。

8,、 脫水封片：將切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-無(wú)水乙醇Ⅰ5min -無(wú)水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脫水透明，將切片從二甲苯拿出來(lái)稍晾干,，中性樹膠封片,。

9、顯微鏡鏡檢,，圖像采集分析,。

 染色結(jié)果：神經(jīng)軸突，神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)原纖維,，神經(jīng)原纖維纏結(jié),，老年斑及樹突呈黑色，背景金黃色,。

鍍銀染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)