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油紅O染色實驗代測

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所  在  地上海市

更新時間:2024-10-26 15:50:44瀏覽次數(shù):684次

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油紅O染色實驗代測
實驗樣本類型:冰凍切片/細胞
主要用途:觀察組織內(nèi)脂肪的含量和定位
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油紅O染色實驗代測

油紅O染色簡介:

油紅O對脂滴的染色機制一般認為是物理學上的溶液作用或吸附作用,,借溶液作用使脂質(zhì)染色,,即油紅O先溶于60%異丙醇中,,然后切片浸入油紅O染液中時,油紅O在組織脂質(zhì)的溶解度較60%異丙醇中的溶解度高,,所以在染色時油紅O從60%異丙醇中轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)中使脂滴顯示紅色,。

油紅O染色步驟(僅供參考):

1、 固定:將冰凍切片復(fù)溫干燥10min;細胞爬片4%多聚甲醛固定15min,,PBS漂洗3次,,5min/次。

2,、 染色:入油紅O工作液孵育10-15min,;細胞爬片破膜10-15min,PBS漂洗3次,,5min/次,,入油紅O工作液37°染色1-2h。

3,、 分化:75%酒精分化2s,,水洗1min。

4,、 復(fù)染細胞核:Harris蘇木素復(fù)染1-2min左右,,自來水洗,1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒,,自來水沖洗,,氨水返藍,流水沖洗,。

5,、 封片:用紙巾吸去周邊水分,甘油明膠封片,。

染色結(jié)果:脂滴呈橘紅色至鮮紅色,,細胞核藍色。

注意事項:

1,、油紅O是對脂類物質(zhì)進行染色,,石蠟切片在處理過程中脂類物質(zhì)無法保存,所以石蠟切片不能進行油紅O染色,。

2,、油紅O染液使用一段時間后,染出的脂滴顏色會偏黃,,此時就需要更換染液。

3,、油紅染色時,,動作要輕,因為脂滴易移位,,并且在封片時應(yīng)避免蓋玻片滑動,;

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