尼氏染色實(shí)驗(yàn)代測

尼氏染色原理：

神經(jīng)元細(xì)胞體包括一個(gè)具有皺褶核膜的大細(xì)胞核,、稀疏的染色質(zhì)和一個(gè)明顯的核仁,。在細(xì)胞體中細(xì)胞質(zhì)是尼氏顆粒，即能夠代表粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)并在很多神經(jīng)元中產(chǎn)生特異的斑點(diǎn)狀嗜堿性表現(xiàn)的嗜堿性顆粒,。尼氏顆?？梢杂煤芏嗳旧珌盹@示如中性紅、亞甲基藍(lán),、甲苯胺藍(lán)和甲基紫等,。染色的變異、pH和分化的時(shí)間使一些染色既可以僅突出尼氏物質(zhì),，也可以顯示神經(jīng)元的細(xì)胞核和神經(jīng)膠質(zhì),。各種神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)都含有尼氏體，但其形狀,、數(shù)量,、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹突中,，但不在于軸突和胞體的軸丘,。尼氏體會(huì)因?yàn)樯頎顟B(tài)的變化而變化，尼氏體是神經(jīng)元內(nèi)蛋白質(zhì)合成的重要部位,，當(dāng)神經(jīng)元受到刺激后,，胞體內(nèi)的尼氏體會(huì)明顯減少。通常尼氏體能被堿性染料如硫堇,、亞-甲藍(lán),、甲苯胺藍(lán)和焦油紫等染料染成紫藍(lán)色。

尼氏染色說明：

1,、細(xì)胞可做染色,，貼壁細(xì)胞做爬片后染色，懸浮細(xì)胞做滴片后染色,。

2,、拍照倍數(shù)分100倍，200倍,，400倍,。正常情況下拍照是200倍3張，400倍3張,。

3,、全景掃描可看任意倍數(shù)。

實(shí)驗(yàn)操作步驟（僅供參考）

1、常規(guī)脫蠟至水（二甲苯I,、二甲苯II各15min,，然后梯度酒精脫水：100%I、100%II,、95%,、90%、80%,、70%,、50%各5min）

2、蒸餾水沖洗3次,，每次5min

3,、然后置于60℃溫箱用1%甲苯胺藍(lán)染色40 min(或用焦油紫染色30s)

4、蒸餾水洗凈染料后,，于分別置于70%,，80%和95%以及100%乙醇中脫水，再用二甲苯透明

5,、后用中性樹膠封片,。

尼氏染色實(shí)驗(yàn)代測