信帆生物提供：凝膠遷移（EMSA）檢測服務(wù)

服務(wù)介紹：EMSA也稱為凝膠遷移實驗或凝膠阻滯實驗,，是一種用于研究蛋白質(zhì)與核酸（DNA或RNA）相互作用的分子生物學(xué)技術(shù),。通過該實驗，可以檢測蛋白質(zhì)是否與特定的核酸序列結(jié)合,，并分析結(jié)合的特異性,、親和力等,。
檢測原理：
EMSA基于核酸-蛋白質(zhì)復(fù)合物在電場中的遷移率與未結(jié)合核酸的蛋白質(zhì)或核酸單體不同的原理。當(dāng)特定的DNA或RNA片段（通常稱為探針）與待測的蛋白質(zhì)樣品混合并孵育時,，如果蛋白質(zhì)能夠與探針結(jié)合,，就會形成核酸-蛋白質(zhì)復(fù)合物。這種復(fù)合物由于分子量較大,，在電場中的遷移速度會比未結(jié)合的核酸或蛋白質(zhì)慢,。通過比較電泳后形成的條帶位置，可以判斷蛋白質(zhì)是否與核酸結(jié)合,，以及結(jié)合的程度,。
實驗步驟：
通常將純化的蛋白和細胞粗提液和32P同位素標(biāo)記的DNA或RNA探針一同保溫，在非變性的聚丙烯凝膠電泳上,，分離復(fù)合物和非結(jié)合的探針,。DNA-復(fù)合物或RNA-復(fù)合物比非結(jié)合的探針移動得慢。同位素標(biāo)記的探針依研究的結(jié)合蛋白的不同,，可是雙鏈或者是單鏈,。當(dāng)檢測 如轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子一類的DNA結(jié)合蛋白，可用純化蛋白,，部分純化蛋白,，或核細胞抽提液。在檢測RNA結(jié)合蛋白時,，依據(jù)目的RNA結(jié)合蛋白的位置,，可用純化或部分純化的蛋白，也可用核或胞質(zhì)細胞抽提液,。競爭實驗中采用含蛋白結(jié)合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段（特異）,， 和其它非相關(guān)的片段（非特異），來確定DNA或RNA結(jié)合蛋白的特異性,。在競爭的特異和非特異片段的存在下,，依據(jù)復(fù)合物的特點和強度來確定特異結(jié)合。
注意事項：
1,、探針設(shè)計：探針的長度,、序列和標(biāo)記方法都需要仔細考慮，以確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,。
2,、實驗條件：實驗條件（如溫度、pH值,、離子強度等）對實驗結(jié)果有很大影響,，需要嚴格控制。
3,、結(jié)果分析：在分析結(jié)果時,，需要注意區(qū)分非特異性結(jié)合和特異性結(jié)合,，以及考慮可能的競爭性和抑制作用。

僅供科研實驗用,，不做其他用途,！