所有產(chǎn)品僅供科研使用,，不能用于食用和醫(yī)療等

C肽放射免疫實(shí)驗(yàn)代測(cè)

通用名：碘[ 125I]人 C 肽放射免疫-分析藥盒

漢語(yǔ)拼音：Dian [ 125I] Ren C-tai Fangshemianyifenxi Yaohe

英文名：Iodine [ 125I] Human C–peptide Radioimmunoassay Kit

簡(jiǎn)稱：碘[ 125I]- C-P 放免藥盒 [使用目的] 用于科研血清樣本中 C 肽(C-P)的定量測(cè)定

[用途] 1) 指導(dǎo)胰島素治療,，對(duì)于胰島素治療的樣本，C 肽測(cè)定可以確定是否繼續(xù)使用胰島素治 療,，還是用口服降糖藥或飲食治療,。C 肽的測(cè)定值對(duì)糖尿病的治療具有重要意義。 2) 對(duì)低血糖綜合癥的診斷,。 3) 對(duì)胰島移植和胰腺移植的樣本,，C 肽測(cè)定可以了解移植是否存活和 B 細(xì)胞的功能,。 4) 同時(shí)測(cè)定 C 肽和胰島素可了解肝病的變化,，如肝硬化時(shí),，外周血 C 肽/胰島素的比值下 降。 5) 對(duì)胰島或胰腺腫瘤-治療后復(fù)發(fā)和功能的診斷,。

[試驗(yàn)原理] 本藥盒采用競(jìng)爭(zhēng)放射免疫分析法,，通過(guò)二抗沉淀抗原-抗體免疫復(fù)合物來(lái)測(cè)定血清中 C 肽的含量，待測(cè)血清,、標(biāo)準(zhǔn)品中的 C 肽和 125I-C–P 與有*的抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,。125I-C–P 一 部分與抗體結(jié)合為復(fù)合物，另一部分游離,。加入分離試劑,，離心使復(fù)合物部分沉淀，與游離 部分分離,，棄去上清液,，測(cè)定沉淀物的放射性計(jì)數(shù)。待測(cè)血清和標(biāo)準(zhǔn)中的 C 肽含量與與復(fù)合 物的放射性強(qiáng)度呈負(fù)相關(guān),，用一系列不同濃度的 C 肽作標(biāo)準(zhǔn),，可獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線 上可查出血清中 C 肽的含量,。

[儀器] 1,、 γ－計(jì)數(shù)器 2、 低溫離心機(jī) 3,、 恒溫水浴箱 [樣本要求] 110 微升科研血清樣本,。 采靜脈血 5ml 于塑料試管中，靜置使其凝固后,，1500 轉(zhuǎn)／分離心,，取其上清液，放置玻 璃瓶中,。如果樣本不立即使用,，可在-18℃~-25℃儲(chǔ)存 6 個(gè)月。 嚴(yán)重溶血,、高濃度的脂類,、膽-紅素對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響。

[注意事項(xiàng)] 1) 收到分析試劑盒后,，盡快存放在 2 – 8℃,。 2) 由于 C 肽在溶液狀態(tài)下極不穩(wěn)定，所以先溶解標(biāo)記物,、抗體,，待一切準(zhǔn)備工作完畢后， 后溶解標(biāo)準(zhǔn)品,。如果分析試劑盒一次用不完,，要做若干次,，那么把標(biāo)準(zhǔn)品溶解后盡快 分裝成若干份，并立即存放在–20℃保存,，避免反復(fù)凍融,。C 肽標(biāo)記物的分裝、使用,、 保存同標(biāo)準(zhǔn)品程序,，避免反復(fù)凍融。 3) 在加分離試劑前,，將分離試劑搖勻,。 4) 分析試管放在 4℃溫育時(shí)，好套上塑料袋,，避免蒸發(fā),，保持一定的反應(yīng)體積。

[實(shí)驗(yàn)方法] 1,、 將實(shí)驗(yàn)所需試劑及樣本放置室溫,，凍干品按操作要求進(jìn)行溶解,平衡至少 30 分鐘 以上才可進(jìn)行操作； 2,、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號(hào),，所有實(shí)驗(yàn)均做雙管重復(fù)； 3,、 每個(gè) NSB 管加入 200µl 溫育液,，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品“0"管 加入 100µl 溫育液； 4,、 取每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品（A~F）,、質(zhì)控血清和樣本 100µl 加入相應(yīng)編號(hào)的試管中； 5,、 每管均各加入 100µl 標(biāo)記物工作液,； 6、 除 T,、NSB 管外,，每管均各加入 100µl 抗體工作液，充分混勻,； 7,、 4℃溫育 24 小時(shí)； 8,、 每管均各加入 500µl 分離劑后,，充分混勻； 9、 室溫放置 15 分鐘后,，離心 3500 轉(zhuǎn)／分,，20 分鐘后，吸去或傾倒掉上清液,； 10,、 用 γ-計(jì)數(shù)器測(cè)定每管 1 分鐘的放射性強(qiáng)度計(jì)數(shù),； 11,、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。

[實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)注意] 1,、 γ-計(jì)數(shù)器本底計(jì)數(shù)應(yīng)≤100CPM/分,，效率應(yīng)≥75％； 2,、 加入放射性標(biāo)記物時(shí),，應(yīng)做好防護(hù)、小心謹(jǐn)慎,，以避免造成放射性污染,； 3、 如果某一個(gè)樣本的測(cè)定值高于高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品濃度,，用零標(biāo)準(zhǔn)品以 1：2 或 1： 4 的比例稀釋樣本后重新測(cè)試,，測(cè)試結(jié)果乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

[質(zhì)量控制] 每次實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)至少采用兩個(gè)濃度的質(zhì)控血清進(jìn)行質(zhì)量控制,，以確保每次實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果 的可靠性,。 1、 質(zhì)控血清的平均值應(yīng)在允許范圍內(nèi),； 2,、 曲線方程應(yīng)采用佳擬合方式； 3,、 重復(fù)樣本的測(cè)定結(jié)果相差在 15％以內(nèi),。 如不能同時(shí)滿足以上條件，則此次試驗(yàn)結(jié)果無(wú)效,，全部試驗(yàn)需重新進(jìn)行,。

[測(cè)定結(jié)果的計(jì)算] 1、 計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品（A~F）,、質(zhì)控品和樣品與標(biāo)準(zhǔn)品 0 的比值（B/B0）; 2,、 劑量-反應(yīng)曲線按“對(duì)數(shù)劑量-結(jié)合率對(duì)數(shù)"（Log(dose-Log(B/ B0))數(shù)學(xué)模型或 四參數(shù)數(shù)學(xué)模型擬合，通過(guò)每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的 B/B0和其濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,； 3,、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣本的濃度值，B/B0不在標(biāo)準(zhǔn)曲線之內(nèi)的樣本及其濃度

[實(shí)驗(yàn)的局限性] 1、 本品僅供體外診斷使用,，只能用于科研血清樣本的測(cè)定而不能用于其他體液樣本,； 2、 通過(guò)其它方法得到的 C-P 值與本品測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性,；

C肽放射免疫實(shí)驗(yàn)代測(cè)