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豚鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒

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所  在  地上海市

更新時間:2024-10-19 07:48:14瀏覽次數(shù):943次

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上海信帆生物供應(yīng)豚鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒,提供技術(shù)指導(dǎo)和售后服務(wù)。本公司銷售的試劑盒均采用進口材料生物試劑,具有操作簡單,,靈敏度高等特點,,咨詢

所有產(chǎn)品僅供科研使用,,不能用于食用和醫(yī)療等

豚鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
本試劑盒含量是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質(zhì)濃度的標(biāo)準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將待測物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育,。洗滌后,,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,,然后加入底物A、B,,和酶結(jié)合物同時作用,。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系
問題1:如果我們代測的樣本是組織樣本,,請問應(yīng)該選用什么來組織勻漿,濃度是多少?
答:一般我們試劑盒的組織勻漿,,都是按照10%進行勻漿,即1g組織加9ml的勻漿液,勻漿液可以選取生理鹽水,,也可以選取PBS,但*是PBS,PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol.
問題2:請問試劑盒在zui后計算的時候,用一般試劑盒測要測組織蛋白濃度,,zui后計算出來的,我們的試劑盒是不是也需要這樣操作?具體怎么計算?
答:對于組織樣本來講,我們建議做蛋白定量.然后把測得的結(jié)果比上蛋白定量的結(jié)果,zui終得到每g蛋白中含有指標(biāo)的量,這樣更為準確!如果不做蛋白定量的話,,就是得到每g組織中含有量!
問題3:請問我訂購了你們的試劑盒,,但是樣本是分批次收集的,我可以分批次實驗嗎,。
答:可以的,,我們的試劑盒橫條是可拆卸的,試劑盒使用之后放到2-8度冰箱保存,,下次可以繼續(xù)使用,,但是建議是拆封之后一個月內(nèi)用完,。
問題4:請問各種標(biāo)本的處理方式,你可以發(fā)給我一下嗎,?
答:當(dāng)然可以,。標(biāo)本要求如下:
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當(dāng)天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本,,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
液體類標(biāo)本: 包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清等。
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心,。
2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。胸腹水、腦脊液參? 照此實行,。
4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。
5.培養(yǎng)細胞:檢測細胞內(nèi)的成份時,,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
6.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),,或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,,其余冷凍備用,。
7.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
8.不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
問題5:麻煩把試劑盒的具體操作步驟發(fā)給我一下,,謝謝,!
答:好的,詳細的操作步驟如下:
1. 加樣:標(biāo)準品設(shè)定5個濃度點10個孔,,每個濃度設(shè)定平行孔,,加入50微升不同濃度的標(biāo)準品,空白孔設(shè)定1個孔加入50微升蒸餾水(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同),、待測樣品孔,,在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。
2. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
3. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。
5. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
6. 溫育:操作同3,。
7. 洗滌:操作同5。
8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
9. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
10. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。
豚鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
問題6:試劑盒操作過程中有什么注意事項嗎?
答:有的,,具體的注意事項如下:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果,。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準曲線,,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。
6. 底物請避光保存,。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
11. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準,。
問題7:請問操作完之后,應(yīng)該怎么計算呢,?
答:你好,,操作完成之后,詳細的計算方式是:以標(biāo)準物的濃度為橫坐標(biāo),,OD值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準曲線查出相應(yīng)的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標(biāo)準物的濃度與OD值計算出標(biāo)準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度,。
問題8:請問你們試劑盒的性能如何,?
答:試劑盒性能的性能我們是通過幾個數(shù)值反應(yīng)的:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和11%
豚鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
上海信帆生物公司主要代理產(chǎn)品:
ELISA試劑盒:進口ELISA試劑盒,國產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,,大鼠ELISA試劑盒,,小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等,。
血清:胎牛血清,科研血清,動物血清,,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。
生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進口試劑,。
標(biāo)準品對照品:進口對照品,進口對照藥材,進口標(biāo)準品.
抗體:一抗,二抗,,流式抗體等。
放免試劑盒:進口放免試劑盒,,國產(chǎn)放免試劑盒,,進口美國鳳凰等放免試劑盒。
實驗室代測服務(wù):放免代測,,WB實驗,,免疫組化代測,熒光定量PCR代測,,病理細胞染色代測,,生化實驗代測等。

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