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所有產(chǎn)品僅供科研使用,，不能用于食用和醫(yī)療等

大鼠血管緊張素轉化酶（ACE）ELISA試劑盒
產(chǎn)品中文：	大鼠血管緊張素轉化酶 (ACE)ELISA試劑盒
產(chǎn)品英文：	Mouse ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：	48T/96T
所需實驗儀器：	酶標儀，洗板機,，離心機
保存條件：	2-8度
有效期：	6個月

試劑盒組成：
試劑盒組成	48T	96T	保存
說明書	1份	1份
封板膜	2片（48）	2片（96）
密封袋	1個	1個
酶標包被板	1×48	1×96	2-8℃保存
標準品	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃保存
標準品稀釋液	1.5ml×1瓶	1.5ml×1瓶	2-8℃保存
酶標試劑	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
樣品稀釋液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑A液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑B液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
終止液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
濃縮洗滌液	(20倍)20ml×1瓶	(30倍)20ml×1瓶	2-8℃保存
注：標準品用標準品稀釋液依次做倍比稀釋
標本要求：
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天就進行檢測的樣本,，及時儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本,，及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,，-70℃凍存?zhèn)溆?。標本應避免反復凍融?/td>
液體類標本: 包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清等,。
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清,，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心,。
2.血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成,，應該再次離心,。
3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。胸腹水,、腦脊液參。照此實行,。
4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清,。
5.培養(yǎng)細胞：檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。
6.組織標本：切割標本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4）,，或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器將標本勻漿化,。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。
7.標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融.
8.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
大鼠血管緊張素轉化酶（ACE）ELISA試劑盒
操作步驟
1. 加樣：標準品設定5個濃度點10個孔,，每個濃度設定平行孔，加入50微升不同濃度的標準品,，空白孔設定1個孔加入50微升蒸餾水（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）、待測樣品孔,，在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。
2. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
3. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用,。
4. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復5次,，拍干,。
5. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外,。
6. 溫育：操作同3,。
7. 洗滌：操作同5。
8. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
9. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉黃色）,。
10. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。

注意事項：
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果,。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣,。
4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
5．封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存,。
7．嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用,。
11. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準。
計算：
以標準物的濃度為橫坐標,，OD值為縱坐標,，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度,；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋
倍數(shù)，即為樣品的實際濃度,。
試劑盒性能：
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上,。
2.批內(nèi)與批間應分別小于9%和11%
保存條件及有效期：
1.試劑盒保存：2-8℃
2．有效期：6個月
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