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所有產(chǎn)品僅供科研使用,，不能用于食用和醫(yī)療等

大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ACE）ELISA試劑盒
產(chǎn)品中文：	大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 (ACE)ELISA試劑盒
產(chǎn)品英文：	Mouse ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：	48T/96T
所需實(shí)驗(yàn)儀器：	酶標(biāo)儀,，洗板機(jī)，離心機(jī)
保存條件：	2-8度
有效期：	6個月

試劑盒組成：
試劑盒組成	48T	96T	保存
說明書	1份	1份
封板膜	2片（48）	2片（96）
密封袋	1個	1個
酶標(biāo)包被板	1×48	1×96	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	1.5ml×1瓶	1.5ml×1瓶	2-8℃保存
酶標(biāo)試劑	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
樣品稀釋液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑A液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑B液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
終止液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
濃縮洗滌液	(20倍)20ml×1瓶	(30倍)20ml×1瓶	2-8℃保存
注：標(biāo)準(zhǔn)品用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液依次做倍比稀釋
標(biāo)本要求：
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本，及時儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本,，及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,，-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
液體類標(biāo)本: 包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清等,。
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心,。
2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)該再次離心,。
3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參。照此實(shí)行,。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。
5.培養(yǎng)細(xì)胞：檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
6.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑,，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
8.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ACE）ELISA試劑盒
操作步驟
1. 加樣：標(biāo)準(zhǔn)品設(shè)定5個濃度點(diǎn)10個孔,，每個濃度設(shè)定平行孔，加入50微升不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,，空白孔設(shè)定1個孔加入50微升蒸餾水（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）、待測樣品孔,，在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。
2. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
3. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用,。
4. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次,，拍干。
5. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外,。
6. 溫育：操作同3。
7. 洗滌：操作同5,。
8. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
9. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
10. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

注意事項(xiàng)：
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果,。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,，以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣,。
4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
5．封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存,。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
11. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準(zhǔn),。
計算：
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo),，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,，根據(jù)樣品的OD
值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度，再乘以稀釋
倍數(shù),，即為樣品的實(shí)際濃度,。
試劑盒性能：
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。
2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和11%
保存條件及有效期：
1.試劑盒保存：2-8℃
2．有效期：6個月
大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 (ACE)ELISA試劑盒,專業(yè)實(shí)驗(yàn)代測
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