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參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)
品 牌GEMIG
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2024-11-11 11:17:02瀏覽次數(shù):1091次
聯(lián)系我時(shí),,請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)Masson染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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服務(wù)介紹:
組織切片及細(xì)胞涂片經(jīng)吉姆薩染色后,,各類細(xì)胞由于其成份的差異而呈現(xiàn)出不同的著色,從而達(dá)到分辨各類細(xì)胞的目的,。本項(xiàng)目為改良吉姆薩染色,,適用于血涂片,肺泡灌洗液細(xì)胞滴片,,骨髓細(xì)胞涂片,,石蠟切片和冰凍切片的染色,染色目的多為觀察各類炎性細(xì)胞的特征及數(shù)量分布,。
實(shí)驗(yàn)流程:
涂片/組織切片-改良吉姆薩染色-脫水封片-顯微鏡鏡檢
結(jié)果判讀:
細(xì)胞類型 | 細(xì)胞特征及染色結(jié)果 |
成熟紅細(xì)胞 | 圓餅狀,,粉紅色,無(wú)核 |
中性粒細(xì)胞 | 細(xì)胞核藍(lán)色,,呈馬蹄形,,桿狀或分葉形;胞質(zhì)淡紫紅色 |
嗜酸性顆粒 | 細(xì)胞核藍(lán)色,,呈馬蹄形,,桿狀或分葉形;胞質(zhì)內(nèi)深紅色顆粒 |
嗜堿性粒細(xì)胞 | 細(xì)胞核藍(lán)色,,呈馬蹄形,,桿狀或分葉形;胞質(zhì)內(nèi)藍(lán)紫色顆粒 |
淋巴細(xì)胞 | 細(xì)胞較小,,核藍(lán)色小而圓,;細(xì)胞質(zhì)較少呈藍(lán)紫色 |
單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞 | 細(xì)胞較大,細(xì)胞核藍(lán)色大而圓,;細(xì)胞質(zhì)淺藍(lán)紫色 |
樣本準(zhǔn)備方法及送樣運(yùn)輸要求(為保證染色成功率,,血液、肺泡灌洗液,、骨髓樣本建議客戶按以下方法自行涂片固定后送樣):
1.涂片的制作方法:
1.1 血涂片制備:
(1)取新鮮血液(若用抗凝管收集的血液,,放置最好不要超過(guò)24h,否則血液中白細(xì)胞的數(shù)量以及種類會(huì)明顯減少),選用干凈的粘附玻片,,用移液槍吸取10ul的血液,,滴加在玻片的一側(cè)(一般都是磨砂對(duì)側(cè))。
(2)再取一片輔助玻片(也可選用蓋玻片,,依據(jù)個(gè)人手的力道習(xí)慣選擇),,以45°角將其寬邊靠近血液,,血液沿著接觸邊緣向兩邊暈開(kāi),,當(dāng)兩邊都到達(dá)邊緣時(shí),,輕輕地穩(wěn)健且勻速地推向磨砂面一側(cè),進(jìn)行涂片,,然后快速果斷地拿走載玻片,。可見(jiàn)涂片首尾分明,,厚薄均勻,。(一般情況下,涂抹速度力道適中的話,,取走玻片時(shí)載玻片上的血幾乎無(wú)殘留,,且涂抹出的血涂片無(wú)明顯細(xì)胞破碎,變形,。在顯微鏡下可觀察到細(xì)胞呈單個(gè)緊密排列,,整體比較均勻。)
(3)自然晾干后,,用甲醇浸泡固定15min,,自然晾干后4℃保存運(yùn)輸。
1.2 肺泡灌洗液和骨髓涂片制備:
(1)取細(xì)胞懸液,,2800r 4℃離心5min去上清,。若沉淀紅色較多,則需要用紅細(xì)胞裂解液(G2015)裂解紅細(xì)胞,。細(xì)胞沉淀加入紅細(xì)胞裂解液200ul,,渦旋混勻,放在冰上裂解2min后加入1ml PBS終止裂解,。2800r 4℃離心5min去上清后加PBS重懸,。若沉淀紅色不多,則不需要裂解紅細(xì)胞,,直接棄上清液,,加PBS重懸。根據(jù)細(xì)胞沉淀量對(duì)應(yīng)加入PBS:
①若肉眼觀察無(wú)明顯細(xì)胞沉淀,,直接加入50ul PBS,,用移液槍吹打混勻后,涂于粘附載玻片上提前用組化筆畫好的小圓圈中(3cm×2cm的橢圓),;
②若細(xì)胞沉淀量為綠豆大小,,加入200ul PBS,用移液槍吹打混勻后,,吸取50ul,,涂于粘附載玻片上提前用組化筆畫好的小圓圈中(3cm×2cm的橢圓);
③若細(xì)胞沉淀量很多,,黃豆大小或更大,,加入1ml PBS,用移液槍吹打混勻后,,吸取150ul,涂于粘附載玻片上提前用組化筆畫好的大圓圈中(最大長(zhǎng)邊約5cm,,最大短邊約2cm的橢圓),。在顯微鏡下觀察細(xì)胞量的多少,若還是過(guò)厚,,再用PBS對(duì)倍稀釋該細(xì)胞懸液,,直至在顯微鏡下觀察到細(xì)胞量涂布均勻。
(2)用移液槍將細(xì)胞懸液鋪滿整個(gè)圓圈,,涂片放置自然晾干(因細(xì)胞未經(jīng)固定,,不可通過(guò)烘箱加快晾干)。
(3)將晾干后的涂片放入丙酮中浸泡固定1min,,自然風(fēng)干,,4℃保存運(yùn)輸。
2. 石蠟切片常溫運(yùn)輸,,冰凍切片-20℃運(yùn)輸,。
樣本種類 | 預(yù)處理過(guò)程 | 固定條件 | 保存運(yùn)輸條件 | 備注 |
血液 | 5-10ul血液涂片 | 甲醇固定15min后自然晾干 | 4℃保存運(yùn)輸 | 血液要用抗凝管采集,取血后立即涂片固定 |
肺泡灌洗液,,骨髓 | 50-150ul細(xì)胞懸浮液涂片
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丙酮固定1min后自然晾干
| 4℃保存運(yùn)輸 |
樣品中紅細(xì)胞較多需要裂解紅細(xì)胞,,取樣后立即涂片固定 |
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