DiI細胞膜紅色熒光染色

服務介紹：

DiI是一種親脂性膜染料,，可以標記細胞膜和其他脂溶性生物結(jié)構(gòu),。進入細胞膜后可以側(cè)向擴散，逐漸使整個細胞膜被染色,。DiI在進入細胞膜之前熒光較弱,，當與細胞結(jié)合后熒光強度會大大增強，被激發(fā)后可以發(fā)出橙紅色熒光,，并可以用標準的TRITC濾光片檢測,。Dil最大激發(fā)波長為550 nm，最大發(fā)射波長為564 nm,。

實驗流程：

1.細胞固定并破膜：培養(yǎng)好的細胞爬片倒去培養(yǎng)基,，用PBS洗。4%多聚甲醛固定30min,，PBS洗3次,，每次5min，滴加0.1%TRITON,，破膜20min. PBS洗滌2-3次,。

2.加diI染料工作液：爬片稍甩干后用組化筆在蓋玻片中間細胞分布均勻的位置畫圈（防止液體流走），加50-100μ diI染料工作液,，37℃孵育5-20分鐘,，PBS洗3次，每次5 min,。

3.DAPI復染細胞核：爬片用PBS（PH7.4）洗滌3次,，每次5min。去除PBS后在圈內(nèi)滴加DAPI染液,，避光室溫孵育10min

送樣運輸要求：

固定好細胞,，換成PBS，4℃ 運輸?shù)綄嶒炇?。目前只接受細胞爬片?/span>