DiO細胞膜綠色熒光染色

服務介紹：

DiO是一種親脂性膜染料,，可以標記細胞膜和其他脂溶性生物結構。進入細胞膜后可以側向擴散,，逐漸使整個細胞膜被染色,。DiO在進入細胞膜之前熒光非常弱，當與細胞結合后熒光強度會大大增強,，被激發(fā)后可以發(fā)出綠色熒光,，并可以用標準的FITC濾光片檢測。DiO最大激發(fā)波長484nm,，最大發(fā)射波長501nm,。

實驗流程：

1.細胞固定并破膜：培養(yǎng)好的細胞爬片倒去培養(yǎng)基，用PBS洗,。4%多聚甲醛固定30min,，PBS洗3次，每次5min,，滴加0.1%TRITON，破膜20min. PBS洗滌2-3次,。

2.加dio染料工作液：爬片稍甩干后用組化筆在蓋玻片中間細胞分布均勻的位置畫圈（防止液體流走）,，加50-100μ dio染料工作液，37℃孵育5-20分鐘,，PBS洗3次,，每次5 min。

3.DAPI復染細胞核：爬片用PBS（PH7.4）洗滌3次,，每次5min,。去除PBS后在圈內(nèi)滴加DAPI染液，避光室溫孵育10min

送樣運輸要求：

固定好細胞,， 換成PBS,，4℃ 運輸?shù)綄嶒炇摇Ｄ壳爸唤邮芗毎榔?/span>