甲基化檢測(cè)MSP

服務(wù)介紹：原理為用亞硫酸氫鈉修飾處理基因組DNA，所有未發(fā)生甲基化的胞嘧啶(C)被轉(zhuǎn)化為尿-嘧啶(U),，而甲基化的胞嘧啶則不變,。據(jù)此設(shè)計(jì)針對(duì)甲基化和非甲基化序列的引物進(jìn)行PCR。通過電泳檢測(cè)MSP擴(kuò)增產(chǎn)物,，如果用甲基化的引物能得到擴(kuò)增片,，,則說明該位點(diǎn)存在甲基化。反之，說明被檢測(cè)的位點(diǎn)不存在甲基化,。若兩對(duì)引物均能得到陽(yáng)性PCR產(chǎn)物,，則說明該片段部分甲基化。

　　實(shí)驗(yàn)流程：

取材-提取基因組DNA-亞硫酸氫鹽處理-純化DNA- MSP引物合成-PCR擴(kuò)增-電泳-數(shù)據(jù)分析-發(fā)報(bào)告

送樣運(yùn)輸要求：

動(dòng)物組織：新鮮的組織量100 mg(黃豆大小),，最少50 mg（綠豆大?。窘M織,、結(jié)締組織,、纖維化組織適當(dāng)增加。干冰運(yùn)輸,。

植物組織：新鮮的葉,、果肉,、種子等最少需100 mg,。干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞：1×10^6個(gè)細(xì)胞,，收集細(xì)胞沉淀,，干冰運(yùn)輸。

全血：最少1 mL新鮮血液EDTA抗凝管,，-20度運(yùn)輸,。

DNA：體積≥50 uL，濃度≥ 50 ng/uL,。

注：植物樣本的甲基化實(shí)驗(yàn)需要客戶提供具體的啟動(dòng)子序列信息,。