常規(guī)病理染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)

HE染色實(shí)驗(yàn)

HE染色法,，即是蘇木精-伊紅染色法。石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 ,。蘇木精染液為堿性,，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色；伊紅為酸性染料,，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)分別稱為嗜堿性和嗜酸性；若于兩種染料的親和力都不強(qiáng),，則呈中性,。一般的組織變化和組織產(chǎn)物都可以通過這一染色法顯示出來。是形態(tài)學(xué)的染色方法,。

染色結(jié)果：細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,，軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,，粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色,，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色,，蛋白性液體呈粉紅色,。

樣本包埋與固定

（1）固定：根據(jù)需要取材后置于福爾馬林中固定48小時(shí)后,；

（2）洗滌與脫水：將固定后的組織用流水沖洗，去除殘留的固定液和雜質(zhì),。不同濃度的乙醇逐級(jí)脫水,，50%、70%,、85%,、95%直至純酒精（無水乙醇），每級(jí)2小時(shí),。70%乙醇中可長(zhǎng)期保存,；

（3）透明：50%酒精+50%二甲苯中2小時(shí)，純二甲苯兩小時(shí),，再一次純二甲苯兩小時(shí),；

（4）浸蠟：先把組織材料塊放在熔化的石蠟和二甲苯的等量混合液浸漬1～2小時(shí),，再先后移入2個(gè)熔化的石蠟液中浸漬各3小時(shí)左右,；

（5）包埋：將浸好蠟的組織塊放入裝有蠟液的容器中，擺好組織塊位置,。待石蠟?zāi)毯髮⒅車嘤嗟氖炄コ?，?zhǔn)備切片；

（6）切片：將切片刀裝在刀片機(jī)的刀架上并固定緊,，固定蠟塊底座或蠟塊,，調(diào)整蠟塊與刀至合適位置，刀刃與蠟塊表面呈5度角,。調(diào)整切片機(jī)上的切片厚度為4-7μm,，然后切片。

HE染色

（1） 脫蠟：60℃,、30min,；二甲苯I 10min、二甲苯II 10min ,；

（2）水化：將脫蠟后的切片經(jīng)100%酒精,、95%酒精、85%酒精,、75%酒精,、雙蒸水各3min ；

（3）將已入蒸餾水后的切片放入蘇木精水溶液中染色數(shù)分鐘,，流水沖洗,；

（4）1%鹽酸酒精分化0.5-1min；

（5）流水沖洗1小時(shí)后入蒸餾水片刻,；

（6）飽和水溶液反藍(lán)1min后流水沖洗,；

（7）入70％和90％酒精中脫水各10min,；

（8）入酒精伊紅染色液染色2-3min；,。

（9）脫水透明：染色后的切片經(jīng)純酒精脫水,，再經(jīng)二甲苯使切片透明；

（10）封片：將已透明的切片滴上中性樹膠,，蓋上蓋玻片封固,。待樹膠略干后，貼上標(biāo)箋,，切片標(biāo)本就可使用,；

圖像采集

通過掃描，采集圖片,。

Masson染色代測(cè)

Masson染色是用于顯示組織中纖維的染色方法之一,，用于膠原纖維染色而經(jīng)典的技術(shù)方法。一般是用兩種或三種陰離子染料混合,，膠原纖維呈藍(lán)色,，肌纖維，胞質(zhì),，纖維素 角蛋白紅細(xì)胞呈紅色,，細(xì)胞胞核呈藍(lán)褐色。用來顯示組織中纖維以及炎性因子的染色方法之一,。

常規(guī)病理染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)