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植物過氧化物酶(POD)(檢測服務)
服務介紹:
植物過氧化物酶(POD)檢測試劑盒(愈創(chuàng)木酚微板法)檢測原理是以愈創(chuàng)木酚(又稱2-甲氧基酚)作為底物,,在酶促反應的最適條件下采用每隔一定時間測定產物生成量的方法,,于酶標儀470nm處測定吸光度,以吸光度變化所需酶量進行計算,,主要用于植物組織的裂解液或勻漿液,、血清等樣品中內源性的過氧化物酶活性,尤其適用于測定水果中過氧化物酶活性,。
背景介紹:
過氧化物酶(POD)是一種廣泛存在于各種動物,、植物和微生物體內的氧化酶,具有消除過氧化氫和酚類胺類毒性的雙重作用,。
POD是植物在逆境條件下酶促防御系統(tǒng)的關鍵酶之一,,與超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)協(xié)同作用,,清除體內過剩的自由基,,從而提高植物的抗逆性。
操作步驟(僅供參考):
1,、 準備樣品:
①植物樣品:取0.5-1.0g植物組織或水果中層果肉加入4ml預冷的POD Lysis Buffer研磨或勻漿,,4℃ 10000g離心15~20min,留取上清液,,即為POD粗提液
②血漿,、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,,-20℃凍存,,用于過氧化物酶的測定。
③細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織裂解液,,如有必要用POD Lysis Buffer進行適當勻漿,,4℃ 10000g離心15~20min,留取上清液,,即為POD粗提液,,
④高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的過氧化物酶,,可以使用POD Lysis Buffer進行恰當的稀釋。
2,、 配制POD Assay Buffer工作液:取適量的POD氧化劑和POD Assay Buffer,,按POD氧化劑:POD Assay Buffer=1:14混合,
3,、 POD加樣:取96孔板,,按照下表設置對照孔孔、測定孔,,注意:對照孔,、測定孔中為同一待測樣品,但對照孔中是提前加熱煮沸5min的樣品
加入物(μl) | 對照孔 | 測定孔 |
待測樣品 | 5(提前煮沸5min) | 5 |
POD Lysis Buffer | 145 | 145 |
POD Assay Buffer工作液 | 100 | 100 |
4,、 POD測定:立即以酶標儀,,以對照孔為對照,測定470nm處測定孔的吸光度(A測定0),;37℃準確孵育3min后,,立即加入5μl POD終止液終止反應(備選方案),以對照孔為對照,,以酶標儀測定470nm處測定孔的吸光度(A測定1),。
實驗結果:
全自動生化儀檢測后導出結果,結果由EXCEL形式發(fā)送,。
送樣須知:
1.南京和上海地區(qū)的客戶可提供上門取樣服務,,提前一天聯(lián)系
2.外地客戶可郵寄樣本,樣本運輸應符合一般的生物學要求,,密封加冰袋或者干冰運輸
3.若細胞,、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性,,請務必提前告知
4.測試結束提供實驗報告后,,樣本可以保留1個月,若需保留樣本或者回收樣本請?zhí)崆案嬷?/span>
備注:本公司對客戶的項目的專有技術和資料(包括實驗方案,,測試結果,,樣本等)負有絕對保密的責任。
僅供科研實驗用,,不做其他用途,!
植物過氧化物酶(POD)(檢測服務)
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