ATP 含量測試盒

（100 管/48 樣）

一,、檢測意義：

三磷酸腺苷（adenosine 5'-triphosphate,，ATP）是生物體內(nèi)能量轉(zhuǎn)換最基本的載體, 其含量的變化直接關(guān)系到各器官的能量代謝。ATP 作為最重要的能量分子在細(xì)胞的各種生理,、病理過程中起著重要作用,。ATP 水平的改變，會影響許多細(xì)胞的功能,。通常細(xì)胞在凋亡,、壞死或處于一些毒性狀態(tài)下，ATP 水平會下降,，而高葡萄糖刺激等對于一些細(xì)胞可以上調(diào)細(xì)胞內(nèi) ATP 水平,。通常ATP 水平的下降表明線粒體的功能受損或下降，在細(xì)胞凋亡時 ATP 水平的下降通常和線粒體的膜電位下降同時發(fā)生狀態(tài),。ATP 含量測定試劑盒可以用于檢測紅細(xì)胞或組織內(nèi)的 ATP 水平,。

二、測定原理：

肌酸激酶催化三磷酸腺苷和肌酸,，生成磷酸肌酸，用磷鉬酸比色法進(jìn)行檢測。

三,、試劑組成及配制：（100 管/48 樣）（本試劑盒附送雙蒸水一瓶,，供客戶配試劑時使用）

[注]：本試劑盒中 ATP3# 粉劑-20℃冷凍保存，其余試劑 4℃保存,，有效期 3 個月,，開封后有效期為 1 個月。

四,、樣本前處理：

1,、紅細(xì)胞：抗凝全血取下層壓積紅細(xì)胞，一般按 1：4 的體積比加雙蒸水進(jìn)行稀釋,，再混勻使溶血,，制備成溶血液。將制好的溶血液加入玻璃試管中沸水加熱煮 10分鐘,，取出混勻抽提 1 分鐘,，4000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 10 分鐘，取上清液待測,。

2,、組織樣本：準(zhǔn)確稱取組織重，按重量（g）：體積（ml）=1：9 的比例,，加入 9 倍體積的冷雙蒸水,，冰水浴勻漿, 制成 10%的勻漿液(取出部分 3500 轉(zhuǎn)/分離心 10 分鐘,取上清測定蛋白濃度)，再置于沸水浴中煮 10 分鐘,，取出混勻抽提 1 分鐘,，3500 轉(zhuǎn)/分離心 10 分鐘，取上清液待

測,。

3,、培養(yǎng)細(xì)胞：先離心處理將細(xì)胞與培養(yǎng)上清分離，除去培養(yǎng)上清,，得到下層沉淀細(xì)胞（一般細(xì)胞數(shù)量達(dá)到 106）,，將收集好的細(xì)胞加入 300～500μL 冷雙蒸水，置于冰水浴中勻漿破碎(取出部分測定蛋白濃度),，后將細(xì)胞懸液于沸水浴中加熱 10 分鐘,，取出混勻抽提 1 分鐘，即可用于測定,。[注]：混勻抽提 1 分鐘即為漩渦混勻 1 分鐘,。

五、操作步驟：

ATP 含量測試盒