DNS試劑-(Ghose法)

【產(chǎn)品名稱】：DNS試劑(Ghose法)                           

【產(chǎn)品規(guī)格】：500ml                         

【儲(chǔ)存條件】：2-8℃

【有效期】：12個(gè)月

【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】：

Ghose法DNS試劑,。又稱3,5-二硝基水楊酸法或簡(jiǎn)稱DNS法,DNS試劑是植物總糖和還原糖檢測(cè)(硝基水楊酸法)的成分之一,定量檢測(cè)植物組織樣品中的總糖和還原糖的含量,。檢測(cè)原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸,，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物,。在一定范圍內(nèi),，還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關(guān)系,。在540nm處測(cè)定棕紅色物質(zhì)的吸光度,，該吸光度值與還原糖含量呈線性關(guān)系。

DNS試劑（Ghose法）是一種可用于物質(zhì)中還原糖含量測(cè)定的試劑,，由苯-酚,、氫氧化鈉,、酒石酸鉀鈉、亞硫酸鈉和3,，5-二硝基水楊酸組成,。 

【操作步驟】(僅供參考)： 

1、 還原糖的提?。?/span>

①稱取植物樣品0.5~3g,，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿,，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中,，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器,。

②50℃水浴30min,，并不時(shí)攪拌，以便還原糖浸出,。

③將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至50ml離心管,，4000g離心5min。

④留取上清液,，向沉淀中加入20ml蒸餾水,，混勻，再次4000g離心5min,。

⑤留取上清液,，將2次獲得的上清液合并，用蒸餾水定容至100ml(提取液),，混勻,，作為還原糖待測(cè)液。

2,、 總糖的水解和提?。?/span>

①稱取植物樣品0.5~3g，剪碎,，加入蒸餾水約3ml勻漿,，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次,，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器,。

②向容器中加入10ml 6M鹽酸溶液，攪拌均勻,，煮沸30min,，并不時(shí)攪拌。

③取2滴滴加于載玻片上,，滴加1滴顯色液,，檢查水解,，如已經(jīng)水解則不顯示藍(lán)色。

④水解完畢后,，冷卻至室溫,，加入6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH至7.4左右,，用蒸餾水定容至100ml,，混勻，4000g離心5min或過(guò)濾,，獲得上清或?yàn)V液,。

⑤取上清或?yàn)V液10ml，用蒸餾水定容至100ml,，成稀釋10倍的總糖水解液(提取液),，取1ml總糖水解液，測(cè)定其還原糖的含量,。

【注意事項(xiàng)】：

1,、 該試劑避免反復(fù)凍融，以免失效或效率下降,，盡量避光保存,。

2、 稀釋鹽酸和氫氧化鈉溶液時(shí),，應(yīng)小心操作,，避免傷人。

3,、 一般市售的濃鹽酸摩爾數(shù)約為11.6M,，應(yīng)稀釋至6M后使用,。

4,、 待測(cè)樣本如不能及時(shí)測(cè)定，應(yīng)置于2~8℃保存,，3天內(nèi)穩(wěn)定,。

5、 如果樣品還原糖濃度過(guò)高,，應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測(cè),，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

6,、 總糖計(jì)算公式在測(cè)定干擾雜質(zhì)很少,、還原糖含量相對(duì)總糖含量很少時(shí)使用，×0.9是為了從測(cè)定出的總糖水解成單糖中,，扣除水解時(shí)所消耗的水量,。

DNS試劑-(Ghose法)