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PCR技術(shù)服務(wù),,QPCR技術(shù)服務(wù),RT-PCR技術(shù)服務(wù)
上海信帆生物提供PCR技術(shù)服務(wù),QPCR技術(shù)服務(wù),RT-PCR技術(shù)服務(wù),,代測時間為2周,,提供原始數(shù)據(jù),電泳圖,,動力擴增曲線圖,,實驗室儀器型號,實驗操作步驟等,,咨詢,!
QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即實時熒光定量核酸擴增檢測系統(tǒng),,也叫實時定量基因擴增熒光檢測系統(tǒng),,簡稱QPCR。
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QPCR有以下特點:
檢測時間短,,只須45分鐘~1小時10分鐘(試劑各異),而定性PCR須3~4小時,,酶免終點定量須6~8小時,,熒光終點定量須2~3小時。
操作極其簡單:前處理后,,樣本插入儀器一小時后到電腦上來出報告即可,,無須開蓋,移樣本(以前方法),,避免污染,。
結(jié)果:定性PCR只能定性,很粗略,,終點定量PCR由于只能在40個熱循環(huán)結(jié)束后檢測熒光,,被測熒光達到飽和導致定量不夠,屬于半定量狀態(tài),。而實時熒光QPCR是在擴增的每時每刻連續(xù)檢測各樣本的熒光值的變化,,
聚合酶鏈式反應(yīng)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA復制,PCR的zui大特點,,是能將微量的DNA大幅增加,。因此,無論是化石中的古生物,、歷史人物的殘骸,,還是幾十年前兇殺案中兇手所的毛發(fā)、皮膚或血液,,只要能分離出一丁點的DNA,,就能用PCR加以放大,進行比對,。這也是“微量證據(jù)”的威力之所在,。由1983年美國Mullis首先提出設(shè)想,1985年由其發(fā)明了聚合酶鏈反應(yīng),,即簡易DNA擴增法,,意味著PCR技術(shù)的真正誕生。到如今2013年,,PCR已發(fā)展到第三代技術(shù),。1973 年,中國臺灣科學家錢嘉韻,,發(fā)現(xiàn)了穩(wěn)定的Taq DNA聚合酶,,為PCR技術(shù)發(fā)展也做出了基礎(chǔ)性貢獻。
PCR(聚合酶鏈式反應(yīng))是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,,低溫(經(jīng)常是60°C左右)時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結(jié)合,,再調(diào)溫度至DNA聚合酶zui適反應(yīng)溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈,?;诰酆厦钢圃斓腜CR儀實際就是一個溫控設(shè)備,能在變性溫度,,復性溫度,,延伸溫度之間很好地進行控制。
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