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當(dāng)前位置:上海信帆生物科技有限公司>>公司動態(tài)>>熱烈慶祝上海大學(xué)再次訂購我司ELISA試劑盒
熱烈祝賀上海大學(xué)王老師再次訂購我司elisa試劑盒!3月份王老師問我司訂購了如下試劑盒:
大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
大鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)ELISA試劑盒
大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PICP)ELISA試劑盒
大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(IFABP)ELISA試劑盒
王老師說用下來效果很好,,現(xiàn)在是后期加做,,選擇繼續(xù)在我司訂購,。在此我們感謝王老師的信任和支持,我們將用更好的產(chǎn)品來回饋廣大新老顧客朋友,!
ELISA試劑盒自備材料:
1. 酶標(biāo)儀,。
2. 自動或者手工洗板機(jī)。
3. 恒溫箱,。
4. 可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器,。
5. 干凈的試管和Eppendof管,。
ELISA試劑盒操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照圖表在小試管中進(jìn)行稀 釋,。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,,然后再加待測樣品10µl(樣品zui終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,。
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,拍干,。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50µl,,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3,。
8.洗滌:操作同 5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50µl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制注意事項:
1,、樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出來的,,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結(jié)果無從談起,。
2,、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi),,包括上限和下限。而對于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段,,即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。
3,、采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度,,ELISA試劑盒這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。
4,、檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品時,,應(yīng)按濃度遞增順序進(jìn)行,以減少高濃度對低濃度的影響,,提高準(zhǔn)確性,。
5、標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個點,,但至少要保證有5個點,。
6、做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎?,但一般來說,,相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98,對于有些實驗,,至少要0.99甚至是0.999.
上海信帆是專業(yè)的ELISA試劑盒銷售供應(yīng)商,,有專門的技術(shù)部門,全程提供技術(shù)指導(dǎo)和免費代測服務(wù),,提供售后服務(wù),咨詢,。
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