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問：我之前定購了大鼠睪酮(T)ELISA試劑盒,，檢測血清的,。我現(xiàn)在想再訂購一盒,，用于檢測細胞,，可以嗎,？
答：大鼠睪酮(T)ELISA試劑盒可以檢測大鼠血清，血漿,，細胞上清液,，細胞裂解液等樣本。
問：如果我的樣本里面含有*,，可以檢測嗎,。
答：疊氮鈉會影響HRP的活性,，對整體檢測有干擾，不適合ELISA方法了,。
一般細胞裂解液不可能含有疊氮鈉,，但如果樣本中含有疊氮鈉，不能做ELISA實驗的,，如果要用elisa檢測 就只能重新裂解
問：那細胞裂解方法是怎么樣的呢,，加入什么試劑？
答：1. 融解RIPA裂解液,，混勻,。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,，使PMSF的zui終濃度為1mM,。
2. 對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2秒后,，細胞就會被裂解,。
對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液,。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,，必需分裝成50-100萬細胞/管，然后再裂解,。
3. 充分裂解后,，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清,，即可進行后續(xù)的PAGE,、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量說明：通常6孔板每孔細胞加入150微升裂解液已經(jīng)足夠,，但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到200微升或250微升,。
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