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雌激素對去勢大鼠骨折愈合早期TGF-β表達的影響
 

初步探討戊酸雌二醇在骨質(zhì)疏松性骨折愈合過程中的作用,，并通過其對TGF-β的影響進一步探討其作用機制,，為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松性骨折的治療提供理論依據(jù)。 方法：選用6月齡雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠54只,，實驗分為SHAM組(假手術(shù)組),、OVX組(去勢組)、補佳樂組,。除SHAM組外,，其余各組均切除雙側(cè)卵巢建立骨質(zhì)疏松動物模型。去勢后8周各組行右股骨骨折建立骨折模型,，同時補佳樂組按0.104(mg/kg/d)灌胃,。三組均在骨折后第2、4,、6,、8周處死大鼠后行放射學(xué)觀察骨痂變化，骨痂HE染色及成骨細胞,、破骨細胞計數(shù),，并采用免疫組織化學(xué)的方法,，觀察各階段骨痂TGF-β的表達變化及半定量分析。 結(jié)果：1.放射學(xué)：OVX組骨痂密度影低,，8周時OVX組骨折線仍然存在,，SHAM組和補佳樂組骨折線模糊甚至消失。2,、骨痂組織學(xué)：OVX組骨小梁表面破骨細胞明顯增多,，成骨細胞也較多，呈骨高轉(zhuǎn)換狀態(tài),。8周時骨小梁變細,、中斷，軟骨成分仍較多,，軟骨性骨痂向骨性骨痂轉(zhuǎn)化緩慢,；SHAM組和補佳樂組隨骨折愈合骨小梁逐漸增加成熟，小梁骨粗大,，排列緊密,，骨小梁表面成骨細胞體積大，胞漿豐富,，破骨細胞減少,。3.成骨,、破骨細胞指數(shù)：2,，4周OVX組破骨細胞指數(shù)大于補佳樂組和SHAM組。成骨細胞指數(shù)在三組間無顯著性差異,。4.TGF-β的免疫組化：OVX組2周時陽性細胞主要是纖維組織內(nèi)的成纖維樣間充質(zhì)細胞和軟骨細胞,，4周時軟骨細胞及周圍基質(zhì)陽性著色。8周時成骨細胞及周圍類骨質(zhì)弱陽性著色,，肥大的軟骨細胞陽性內(nèi)表達少或無,。補佳樂組2周時軟骨細胞出現(xiàn)強陽性染色，4周時成骨細胞內(nèi)陽性染色增強,，周圍基質(zhì)也可見陽性染色,，軟骨細胞內(nèi)很少或無陽性表達。8周時軟骨細胞內(nèi)染色陰性,，陽性表達主要位于周圍類骨質(zhì),。SHAM組與補佳樂組類似。5.TGF-β半定量分析：各組在2周時蛋白陽性表達積分光密度值達到峰值,，以后逐漸下降,，4周后下降明顯。不同時間點OVX組積分光密度值均明顯低于SHAM組和補佳樂組,。 結(jié)論⒈本實驗結(jié)果顯示補佳樂(戊酸雌二醇)減少破骨細胞數(shù)目,，增加了成骨細胞活性,，抑制骨吸收、促進骨形成,，抑制了去勢后骨的高轉(zhuǎn)換狀態(tài),，促進軟骨性骨痂向骨性骨痂轉(zhuǎn)化，提示戊酸雌二醇對于促進絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松性骨折早期愈合是有效的,。 ⒉TGF-β在補佳樂組和SHAM組的表達均明顯高于OVX組,，且主要表達于處于功能活躍期的軟骨細胞和成骨細胞及其周圍基質(zhì)。提示TGF-β促進軟骨和骨形成,，抑制骨吸收,，是骨折愈合中重要的細胞因子之一，雌激素可促進TGF-β的分泌,，是雌激素促進骨質(zhì)疏松性骨折愈合可能的機制之一,。