上海信帆為您提供熒光蛋白上樣緩沖液,！

產(chǎn)品簡介：

熒光蛋白上樣緩沖液在電泳前的樣品處理階段對SDS-PAGE的蛋白樣品進行預染,，標記上熒光,。實驗完成以后，凝膠中或轉(zhuǎn)膜后的蛋白條可直接通過紫外燈,、LED燈或其他數(shù)字成像系統(tǒng)進行觀察和分析,，無需染色脫色。
熒光蛋白上樣緩沖液靈敏度高比銀染高,。穩(wěn)定性強,，背景低?？蓪λ械鞍走M行染色,，不影響蛋白的遷移率與電泳圖譜。電泳過程中,，游離的染料分子與溴酚藍的遷移速率一致,，跑膠結(jié)束時 移至凝膠末端,，背景干凈。熒光蛋白上樣緩沖液非常適合用于追蹤蛋白表達純化以及Western blot的SDS-PAGE,。

使用步驟    

1. 請在使用前根據(jù)管壁標簽上的體積加入resuspension buffer重懸,。Resuspension buffer在4℃可能會有沉淀產(chǎn)生，室溫下放置至沉淀消失,。
2. 將用上樣緩沖液處理的蛋白樣品與待電泳蛋白樣品1:2混合,。比如，3ul 上樣緩沖液 + 6ul 蛋白樣品,。
3. 90-100℃加熱上述處理的樣品混合液5分鐘,。細胞或組織樣品，加熱時間延長至10分鐘,。確保加熱溫度>90℃使樣品充分受熱,。
? 大部分預制膠（Bis-Tris體系除外）可以直接進行下一步。Bis-Tris體系的預制膠(如Life Technology),，需加入20%已處理樣品體積的Enhancing buffer,。比如，10ul已處理的樣品需加入2ul Enhancing buffer,。
4. 樣品可以上樣進行電泳了（無需再加Loading Buffer處理）,。
5. 電泳結(jié)束后，將凝膠放至透射儀上進行觀察和拍照,。透射儀可以是紫外燈，藍光LED燈或其它凝膠成像系統(tǒng),。如果光源在可見光波長范疇的無需剝膠,，因為可見波長范圍內(nèi)的光可以穿透玻璃或塑料材質(zhì)的膠板。
6. （可選的）如果有需要,，經(jīng)熒光蛋白上樣緩沖液處理的凝膠仍可進行考染,。按標準的考染步驟進行即可。

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注意事項：

1. 請勿使用該上樣緩沖液處理預染的或預處理的蛋白分子量標準,。這些產(chǎn)品與熒光蛋白上樣緩沖液不兼容。
2. 靈敏度影響因素：GAO pH（大于7）不會影響染色,，低pH則會降低染色的效率,，如果樣品的pH低于5，建議將pH調(diào)整至7以上,。
3. 熒光蛋白上樣緩沖液不適合在如下SDS-PAGE實驗中使用：切割蛋白條帶用以測序,、質(zhì)譜分析或抗體制備。

4. 建議-20保存,，如果室溫放置2-3周,，則可添加新的DTT，蛋白條帶會重新變得清晰和明亮。添加DTT的終濃度不要超過20 mM,。也可以添加其他還原劑TCEP(2 mM),， 效果也很好。

規(guī)格：

每個規(guī)格包含3管：Instant-Bands, Resuspension Buffer 和Enhancing buffer,。只有使用Bis-tris 膠時才需要加Enhancing Buffer.

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