人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM) 酶聯(lián)免疫分析試劑盒
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)水平,。用純化的人血栓調(diào)
節(jié)蛋白(TM)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入人血栓調(diào)節(jié)蛋
白(TM),,再與HRP 標(biāo)記的血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)抗體結(jié)合,,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,
經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色,。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下
轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm
波長下測定吸光度(OD 值),,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)濃度。
計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),,OD 值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計算出標(biāo)
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準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),
即為樣品的實際濃度,。
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果,。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。
6.底物請避光保存,。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準(zhǔn),。