馬麻疹病毒（MV）elisa試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用,。
96T
使用目的：
本試劑盒用于測定馬血清,、血漿及相關液體樣本中麻疹病毒（MV）表達,。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中馬麻疹病毒（MV）表達。用純化的馬麻疹病毒（MV）
抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，可與樣品中麻疹病毒（MV）相結合，經(jīng)洗滌除去未結合
的抗原和其他成分后再與HRP 標記的麻疹病毒（MV）抗體結合,，形成抗體-抗原-酶標抗體
復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色,。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色,，并在酸
的作用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，與CUTOFF
值相比較,，從而判定標本中馬麻疹病毒（MV）的存在與否。
馬麻疹病毒（MV）elisa試劑盒試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 陽性對照 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 陰性對照 0.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
馬麻疹病毒（MV）elisa試劑盒操作步驟
1. 編號：將樣品對應微孔按序編號,，每板應設陰性對照2 孔、陽性對照2 孔,、空白對照1
孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）
2. 加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照50μl,。然后在待測樣品孔先
加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不
觸及孔壁，輕輕晃動混勻,，
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘,。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30 秒后棄去，如此
重復5 次,，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉黃色）,。
11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）,。 測定應在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進行,。
計算和結果判定：
試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品OD 值< 臨界值（CUT OFF）者為麻疹病毒（MV）陰性
陽性判定：樣品OD 值≥ 臨界值（CUT OFF）者為麻疹病毒（MV）陽性
。
注意事項
1．操作嚴格按照說明書進行,，本試劑不同批號組分不得混用,。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完,，板條應裝入密封袋中保存,。
3．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果,。
4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
5．底物請避光保存,。
6．試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準，使用雙波長檢測時,，參考波長為630nm
7．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M 的硫酸,，使用時必須
注意安全,。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃,。
2．有效期：6 個月
