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888次土壤多酚氧化酶(Solid-Polyphenol oxidase,,S-PPO)試劑盒說(shuō)明書(shū)
分光光度法 50 管/48 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
S-PPO 主要來(lái)源于土壤微生物,、植物根系分泌物及動(dòng)植物殘?bào)w分解釋放,,催化土壤中芳香族
化合物氧化成醌,醌與土壤中蛋白質(zhì),、氨基酸,、糖類(lèi)、礦物等物質(zhì)反應(yīng)生成有機(jī)質(zhì)和色素,,
完成土壤芳香族化合物循環(huán),,用于土壤環(huán)境修復(fù)。
測(cè)定原理:
S-PPO 能夠催化鄰苯三酚產(chǎn)生有色物質(zhì),,后者在430nm 有特征光吸收,。
自備用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī),、水浴鍋,、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿,、yi醚100mL(不
允許快遞),、蒸餾水。
試劑組成和配制
試劑一:粉劑×2 瓶,,臨用前每瓶加入15mL 蒸餾水,,用不完的試劑仍4℃保存;
試劑二:液體10mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑三:yi醚50mL×2 瓶,4℃保存,;(自備)
樣品處理
新鮮土樣自然風(fēng)干或37 度烘箱風(fēng)干,,過(guò)30~50 目篩。
測(cè)定步驟
試劑名稱(chēng) 測(cè)定管
風(fēng)干土樣(g) 0.05
試劑一(μL) 500
振蕩混勻,,30℃恒溫培養(yǎng)1 h
試劑二(μL) 200
試劑三(μL) 1750
振蕩數(shù)次,,室溫靜置30min,用蒸餾水調(diào)零,,取1mL 上層液于430nm 處測(cè)定吸光值A(chǔ),。
S-PPO 活力計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 8.97x -0.003,;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),,y 為吸光值A(chǔ)。
單位的定義:每天每g 土樣中產(chǎn)生1mg 紫色沒(méi)食子素定義為一個(gè)酶活力單位,。
S-PPO 活力(mg/d /g 土樣)=(A+0.003) ÷8.97×V 反總÷W÷T=131×(A+0.003)
T:反應(yīng)時(shí)間,,1h=1/24d; V 反總:反應(yīng)體系總體積2.45mL,;W:樣本質(zhì)量,,0.05g,。
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