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NanoLuc™螢光素酶是Promega公司推出一種新型的螢光素酶,,它具有分子量更小(19.1kDa, 171個(gè)氨基酸),,發(fā)光更亮,比任何現(xiàn)有的生物發(fā)光酶用途更加廣泛的特點(diǎn),,它是目前性能的生物發(fā)光報(bào)告基因之一,。NanoLuc™螢光素酶的這些屬性為報(bào)告基因檢測提供了新的功能,,在需要更高靈敏度的復(fù)雜生物學(xué)應(yīng)用中深具潛力。
NanoLuc技術(shù)包含一種新型底物——furimazine和一種*的酶(NanoLuc™螢光素酶),,前者由Promega公司有機(jī)化學(xué)家開發(fā),,后者由Promega公司的研究科學(xué)家利用定向進(jìn)化技術(shù)開發(fā)。它具有*的小巧體積,,可以用于增強(qiáng)的病毒傳遞和蛋白融合,,而且它很容易從細(xì)胞中分泌。NanoLuc™螢光素酶比螢火蟲(Photinus pyralis)或海腎(Renilla reniformis)螢光素酶的發(fā)光高兩個(gè)數(shù)量級,,在難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中也能獲得更好表現(xiàn),。此外,NanoLuc可應(yīng)用在更多相關(guān)模型中,,包括復(fù)雜的生物樣品,。NanoLuc螢光素酶簡單易用——僅需加樣-檢測,且信號穩(wěn)定,,可以不經(jīng)任何改良,,實(shí)現(xiàn)從實(shí)驗(yàn)臺操作到高通量篩選的規(guī)模放大應(yīng)用。
為滿足在“下一代”遺傳報(bào)告基因中的多種應(yīng)用需求,,我們提供12個(gè)版本的 NanoLuc螢光素酶質(zhì)粒,。產(chǎn)品包括NanoLuc-PEST(NlucP),它將蛋白表達(dá)水平變化與轉(zhuǎn)錄活性改變密切偶聯(lián),,并增加信噪比,。對于分泌型報(bào)告基因,我們通過融合N-末端分泌信號(secNluc)來制備NanoLuc螢光素酶載體,。使用Nano-Glo™螢光素酶檢測試劑,,發(fā)光量在跨越1,000,000倍的濃度范圍內(nèi)呈線性關(guān)系,且信號半衰期≥2小時(shí),。
手機(jī)拍攝的NanoLuc™螢光素酶發(fā)光信號,。(注:96-孔板中, 轉(zhuǎn)染了NanoLuc™螢光素酶載體的HEK293細(xì)胞,,50000細(xì)胞/孔)
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