TMB 經(jīng)HRP 作用后，約40 分鐘顯色達,，隨即逐漸減弱,，至2 小時后即可*消退至無色。TMB 的終止液有多種,，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止,。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24 小時)不褪，是目視判斷的良好終止劑,。此外,，各類酸性終止液則會使藍色轉(zhuǎn)變成黃色，此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值,。酶標比色儀簡稱酶標儀,，通常指于測讀ELISA 結(jié)果吸光度的光度計。酶標儀的主要性能指標有：測讀速度,、讀數(shù)的準確性,、重復(fù)性、度和可測范圍,、線性等等,。優(yōu)良的酶標儀的讀數(shù)一般可到0.001，準確性為±1%,，重復(fù)性達0.5%,。酶標儀不應(yīng)安置在陽光或強光照射下，操作時室溫宜在15 -30℃ ,，使用前先預(yù)熱儀器 15-30 分鐘,，測讀結(jié)果更穩(wěn)定。

測讀 A 值時,，要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰,，如OPD用492nm 波長。有的酶標儀可用雙波長式測讀,，即每孔先后測讀兩次,，*次在zui適波長(W1)，第二次在不敏感波長(W2),，兩次測定間不移動ELISA 板的位置,，zui終測得的A 值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

肉眼判斷結(jié)果時,，顯色淺不易觀察,，影響結(jié)果的準確性，必須使用酶標儀檢測,，以保結(jié)果一致性,。

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ELISA實驗中,，顯色和比色的注意事項

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