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ELISA 樣本處理的注意事項

時間:2015/4/17閱讀:1278
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每個標(biāo)本量收集體積= 50ul × 檢測種類,,如要做復(fù)孔,,標(biāo)本量收集體積= 50ul × 檢測 種類×2 ,。

 對于作某一個具體指標(biāo)來說,,先用一系列稀釋度作一批標(biāo)本測定,,得出對實驗有意義 的一個稀釋度(即測定劑量反應(yīng)曲線),然后用一個zui適稀釋度測定即可,。

         收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,儲存在

4  備用,,如有特原因要周期集標(biāo),,標(biāo)時分裝放在 -20   -70  

件下保免反復(fù),。標(biāo)本 2 -8  可保存 48 時,, -20  可保存 1  -70 

可保存 6 個月,。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶,。

血清標(biāo)本采集時,應(yīng)注意避免溶血,,紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),,  HRP 為標(biāo)記的 ELISA 測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色,。

      為了保證尿液檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,,必須正確收集尿液標(biāo)本和保存。盛尿容器要清潔干燥,。

使用一次性的容器(如塑料尿杯),,避免因用藥并清洗不干凈而造成的污染,影響檢 測結(jié)果,。尿液標(biāo)本必須新鮮,,留取后,應(yīng)及時檢測或保存,,以免細(xì)菌繁殖,。因在室溫中久 置后(尤其是夏季)尿中磷酸鹽等可析出結(jié)晶而干擾檢測。

標(biāo)本宜在新鮮檢測,。如有細(xì)污染,,菌體含有內(nèi)性HRP會產(chǎn)假陽性應(yīng),。 保存過久可發(fā)生聚合在 ELISA 中可使本底加深,。

凍結(jié)標(biāo)本融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,,分布不均,,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛 倒混和,,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩,。

     混濁或有沉淀的標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測,。

反復(fù)凍融會使蛋白效價降低,,所以待測標(biāo)本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存,。也可 加入適當(dāng)防腐劑,。

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