溫育常采用的溫度有43℃,、37℃、室溫和4℃等,。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時,，實驗表明,，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1～2小時，產(chǎn)物的生成可達,。為加速反應(yīng),，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗在43℃進行,，但不宜采用更高的溫度?？乖贵w反應(yīng)4℃更為*,，在放射免疫測定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜，以形成zui多的沉淀,。但因所需時間太長,，在ELISA試劑盒中一般不予采用。
　　
　　保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,，一般均采用水浴,，可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中,，ELISA板底應(yīng)貼著水面，使溫度迅速平衡,。為避免蒸發(fā),，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,，此時可讓反應(yīng)板漂浮在水面上,。若用保溫箱，ELISA試劑盒應(yīng)放在濕盒內(nèi),，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,，在盒底墊濕的紗布，zui后將ELISA板放在濕紗布上,。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度,，特別是在氣溫較低的時候更應(yīng)如此。無論是水浴還是濕盒溫育,，反應(yīng)板均不宜疊放,，以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應(yīng),，操作時的室溫應(yīng)嚴格限制在規(guī)定的范圍內(nèi),，標準室溫溫度是指20～25℃，但具體操作時可根據(jù)說明書的要求控制溫育,。室溫溫育時,，ELISA試劑盒只要平置于操作臺上即可。應(yīng)注意溫育的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準確,。為保證這一點,，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板同時測定,。
 

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