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TTC染色液2%的染色結(jié)果
【產(chǎn)品名稱】 TTC染色液2%
【產(chǎn)品規(guī)格】 :100ml
【儲存條件】 :-20℃冰凍
【有效期】 :6個(gè)月
【產(chǎn)品介紹】 :
2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,,TTC),,分子量為334.80,分子式為C19H15ClN4,,CAS號為298-96-4,。TTC是脂溶性光敏感復(fù)合物,,最初用于檢測種子生存能力,后來用于染色檢測哺乳動物組織的缺血梗塞,,TTC是呼吸鏈中吡啶核苷結(jié)合酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,,TTC與正常組織中的呼吸酶反應(yīng)而呈紅色,而缺血組織內(nèi)呼吸酶活性下降,,不能反應(yīng),,故不會產(chǎn)生變化呈蒼白色,該染色是一種用于評價(jià)組織內(nèi)脫氫酶活性的大體染色方法,。
TTC染色液(2%)對心肌梗死及腦組織壞死區(qū)的觀測較電鏡早3~6h,,較光鏡早24h,多用于尸檢中的新鮮心臟組織和腦組織以及實(shí)驗(yàn)動物模型早期梗死組織的染色,。其特點(diǎn):①TTC染色直接取材于新鮮組織即可染色,,無需固定、包埋等步驟,;②TTC染色時(shí)間短,,一般20~30min;③TTC染色液可重復(fù)使用,,10ml可染20張片子,。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途,。
自備材料:
1,、生理鹽水
2、低溫冰箱
3,、4%多聚甲醛或10%中性福爾馬林
操作步驟(僅供參考):
(一)腦組織染色
1,、取待檢新鮮腦組織樣本(一 般可麻醉后直接取腦或經(jīng)生理鹽水灌注后取腦)取出后-20℃速凍20~ 30min,便于切片。
2,、將待檢腦組織切片,一般動物樣本層厚2~ 3mm ,人的樣本層厚3 ~ 5mm ,可連續(xù)切4~5張,。第一刀在腦前極與視交叉連線中點(diǎn)處;第二刀在視交叉部位;第三刀在漏斗柄部位;第四刀在漏斗柄與后葉尾極之間(參考:張均田主編,現(xiàn)代藥理試驗(yàn)方法),。
3,、切片入TTC Stain(2%)避光浸染30 ~ 35min。
4,、切片入4%多聚甲醛或10%中性福爾馬林中固定4~ 24h,。
5、吸干組織表面清水,,應(yīng)用IPP等圖像分析系統(tǒng)測量腦梗死面積并計(jì)算大腦梗死體積,。
(二)種子染色
1、取不同活力的種子用刀片做橫切和沿種胚中央準(zhǔn)確縱切,取每粒種子的一半備用,。
2,、將上述種子置于TTC染色液(2%)中, 37°C避光孵育20min,。
3、倒出染色液,,自來水沖洗2~3次,,立即觀察種胚著色情況。
染色結(jié)果:
正常心肌或腦組織 | 紅色 |
心肌或腦梗壞死區(qū) | 蒼白色 |
缺血腦組織 | 介于紅色與蒼白色之間 |
注意事項(xiàng):
1,、 TTC Stain(2%)對人體有輕微刺激性,,請注意小心防護(hù)。
2,、取腦時(shí)應(yīng)仔細(xì)保持大腦的完整性,。
3、如果染色效果不佳,,應(yīng)適當(dāng)延長染色時(shí)間。
4,、樣本越新鮮越好,,為了防止正常心肌及腦組織的酶活性減弱或消失,應(yīng)盡快染色,。
5,、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴-次性手套操作,。
TTC染色液2%的染色結(jié)果
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