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植物類黃酮檢測試劑盒的技術參數(shù)
一、測定意義:
類黃酮是一類多苯化合物,,屬于植物次生代謝物,,對人
體具有消炎,抗菌,,降血脂,,清除體內(nèi)羥自由基,預防癌癥
等作用
二,、測定原理:
在堿性亞硝酸鹽溶液中,,類黃酮與鋁離子形成在502nm處
有特征吸收峰的紅色絡合物,測定樣品提取液在502nm處的吸
光值,,即可計算樣品類黃酮含量,。
三,、儀器設備(自備):
烘箱、粉碎儀,、研缽,、篩子、60%乙醇,、離心機,、可見分
光光度計、60℃震蕩恒溫箱,。
四,、試劑組成:(50T/48 樣)
提取液:60%乙醇,自備,。
試劑一:液體2mL×1 瓶,,4℃保存。
試劑二:液體2mL×1 瓶,,4℃保存,。
試劑三:液體25mL×1 瓶,4℃保存,。
試劑四:標準品粉劑 1mg×1支,,使用時加入1mL 60%乙醇,
于60℃恒溫振蕩10分鐘使其溶解,,配成mg/mL
標準應用液,。
五、操作步驟:
1,、類黃酮提?。?/span>
干樣:將樣本烘干至恒重,粉碎,,過40目篩之后,,稱取約0.02g,
加入2mL 提取液,,60℃震蕩提取2小時,,10000g,室溫
離心10min,,取上清,,待測。
鮮樣:將植物用生理鹽水清洗后,,將表面水分擦干,,剪碎,
液氮研磨成粉狀,,稱取約0.05g,,加入2mL提取液(含
量低可酌情減少提取液量),,60℃震蕩提取2小時,
10000g,,室溫離心10min,,取上清,待測,。
2,、操作表:
注:正式實驗前最好取1-2例相對差異較大的樣本進行預試,
ΔA測定大于1時需要稀釋樣本上清后再測定,。
六、計算公式:
制作標準曲線:將1mg/mL標準液用60%乙醇稀釋成
0.1mg/mL,、0.08mg/mL,、0.06mg/mL、0.04mg/mL,、
0.02mg/mL幾個濃度按操作表標準管及空白管進行實驗,,
得出OD值后繪制標準曲線,如下:
則計算公式為:
類黃酮含量(mg/g)=(ΔA測定-0.0141)÷9.0771×提取液總體
積(2mL)÷樣本質(zhì)量(g)
七,、技術參數(shù):
1,、試劑盒檢出限為1μg/mL,如果ΔA測定值大于1,,則需將樣本
上清液作適當稀釋以后測定,;
2、本試劑盒回收率可達95%-100%,,穩(wěn)定性好,,準確性高;
3,、標準品配置時溫度低會使其溶解緩慢,,60℃振蕩溶解時需
密封好,防止液體溢出造成損失,;
4,、假如沒有分光光度計,也可用酶標儀進行測定,,波長不變
(或者在±10nm波動范圍內(nèi)選擇),。
植物類黃酮檢測試劑盒的技術參數(shù)
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