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人外周血淋巴細胞分離液(FICOLL配制)這樣使用更方便
人外周血淋巴細胞主要是指體內(nèi)的淋巴細胞,,主要包括T細胞和B細胞。外周血淋巴細胞能夠幫助人體抵御外來的細菌和病毒,,能夠起到良好的免疫作用。人外周血淋巴細胞分離液(FICOLL配制)是一種用于分離人外周血淋巴細胞的無菌,、低內(nèi)毒素水平的密度梯度分離液,。
產(chǎn)品名稱:人外周血淋巴細胞分離液(FICOLL配制)
產(chǎn)品規(guī)格:200ml
儲存條件:室溫,避光
產(chǎn)品指標:
密度 1.077±0.001g/mL
滲透壓 290~350mOsm/kgH2O
無菌 0.1μm 濾膜過濾
原理:根據(jù)血細 胞的密度差異(紅細胞和粒細胞密度為1.090g/mL左右,;淋巴細胞和單核細胞密度為1.075~1.090g/mL,;血小板為 1.030~1.035g/mL),通過離心使一定密度的細胞按相應(yīng)密度梯度分布,,從而將淋巴細胞從人外周血或臍帶血中分離出來,。
實驗步驟(僅供參考)
1. 取新鮮抗凝全血(EDTA,、枸櫞酸鈉或肝素抗凝均可)或者去纖維蛋白血液,用等體積的全血及組織稀釋液 或者PBS稀釋全血,。
2. 在離心管中加入適量分離液,,將稀釋后的血液平鋪到分離液液面上方,注意保持兩液面界面清晰,。
3. 室溫,,水平轉(zhuǎn)子500~1000g,離心20~30min (血液的體積越大所需的離心力越大,,離心 時間越長,,佳的分離條件需摸索,離心轉(zhuǎn) 速大不超過1200g),。
4. 離心后將出現(xiàn)明顯的分層:上層是稀釋的 血漿層,,中間是透明的分離液層,血漿與分 離液之間的白膜層即為淋巴細胞層,,離心管 底部是紅細胞與粒細胞,。
5. 小心的吸取白膜層細胞到15mL潔凈的離心 管中, 10mL PBS或細胞洗滌液洗滌白膜層 細胞,。250g,,離心10min。
6. 棄上清,,5mL的PBS或細胞清洗液重懸細胞,,250g,離心10min,。
7. 重復(fù)上一步驟棄上清,,細胞重懸備用
注意事項:
1、本產(chǎn)品僅供科研實驗用,,不做其它用途,。
2、本裂解液為無菌產(chǎn)品,,分離細胞用于細胞培養(yǎng)時請注意無菌操作,。
3、為了您的安全與健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
人外周血淋巴細胞分離液(FICOLL配制)這樣使用更方便
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